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星雨001鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
激光掃描共聚焦顯微技術(shù):原理;標(biāo)本制備和圖像采集;應(yīng)用,方面的論文
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| 求助各位蟲友關(guān)于激光掃描共聚焦顯微技術(shù):原理;標(biāo)本制備和圖像采集;應(yīng)用的論文 |
鐵蟲 (初入文壇)
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激光共聚焦顯微鏡的主要原理是利用激光掃描束通過光柵針孔形成點(diǎn)光源,在熒光標(biāo)記標(biāo)本的焦平面上逐點(diǎn)掃描,采集點(diǎn)的光信號通過探測針孔到達(dá)光電倍增管(PMT),再經(jīng)過信號處理,在計(jì)算機(jī)監(jiān)視屏上形成圖像。由于激光光源的光柵針孔和探測針孔對物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點(diǎn)同時(shí)聚焦于光柵針孔和探測針孔,進(jìn)行點(diǎn)掃描時(shí),掃描點(diǎn)以外的點(diǎn)不會成像,經(jīng)逐點(diǎn)掃描后才形成整個(gè)標(biāo)本的光學(xué)切片(Optic section)。 主要生物學(xué)應(yīng)用 1、組織和細(xì)胞中熒光標(biāo)記的分子和結(jié)構(gòu)的檢測 標(biāo)本制備方法主要有免疫熒光組織和細(xì)胞化學(xué)法、熒光蛋白標(biāo)記分子法、熒光細(xì)胞染料標(biāo)記法等。 2、定量或半定量測量Ca2+ 和pH等細(xì)胞內(nèi)離子濃度及變化 利用Fluo23 、Fura2等熒光探針可以測量Ca2+在活細(xì)胞內(nèi)的濃度及變化。 3、熒光光漂白及恢復(fù)技術(shù) 利用高能量激光束將細(xì)胞內(nèi)某一部分中選定靶區(qū)域的某種熒光淬滅,然后觀察鄰近相同的熒光標(biāo)記物重新擴(kuò)散入該區(qū)域的速度和方式,從而分析細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)運(yùn)輸、受體在細(xì)胞膜上的流動和大分子組裝等細(xì)胞生物學(xué)過程。 4、長時(shí)程觀察細(xì)胞遷移和生長 可以用于數(shù)小時(shí)的長時(shí)程定時(shí)掃描,記錄細(xì)胞遷移和生長等細(xì)胞生物學(xué)現(xiàn)象。 5、其他的生物學(xué)應(yīng)用 用高能量激光束進(jìn)行細(xì)胞損傷和損毀實(shí)驗(yàn),一般要用紫外激光束進(jìn)行細(xì)胞損毀;細(xì)胞間通訊研究;光解籠鎖活化技術(shù)等。 |
鐵蟲 (初入文壇)
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