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xinyaolu木蟲 (小有名氣)
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[求助]
疏水柱為何掛不上蛋白，求解！
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 本人在做蛋白純化，使用了GE的pheny（high sub ）預(yù)裝柱。蛋白用40%硫酸銨沉淀后，分別用含有0.5M，1M，1.5M 硫酸銨或者2M Nacl 的50mM pH7.0的磷酸鈉緩沖液復(fù)溶，膜過濾后均有檢測(cè)到酶活。當(dāng)用高鹽溶液平衡柱子后，發(fā)現(xiàn)沒有任何蛋白掛上柱，隨后的洗脫過程中一點(diǎn)蛋白峰都沒有，連咋蛋白都沒有。 透過液中有檢測(cè)到酶活。 我的蛋白在40%硫酸銨中基本都沉淀下來。 讓我糾結(jié)的是為何一點(diǎn)蛋白都沒掛上，連雜蛋白都沒有 向各位求解！ |
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