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xinyaolu木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
疏水柱為何掛不上蛋白，求解！
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 本人在做蛋白純化，使用了GE的pheny（high sub ）預(yù)裝柱。蛋白用40%硫酸銨沉淀后，分別用含有0.5M，1M，1.5M 硫酸銨或者2M Nacl 的50mM pH7.0的磷酸鈉緩沖液復(fù)溶，膜過(guò)濾后均有檢測(cè)到酶活。當(dāng)用高鹽溶液平衡柱子后，發(fā)現(xiàn)沒(méi)有任何蛋白掛上柱，隨后的洗脫過(guò)程中一點(diǎn)蛋白峰都沒(méi)有，連咋蛋白都沒(méi)有。 透過(guò)液中有檢測(cè)到酶活。 我的蛋白在40%硫酸銨中基本都沉淀下來(lái)。 讓我糾結(jié)的是為何一點(diǎn)蛋白都沒(méi)掛上，連雜蛋白都沒(méi)有 向各位求解！ |
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tianliudut
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3樓2011-06-08 12:54:58
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4樓2011-06-08 15:11:37
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