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shaquila金蟲 (正式寫手)
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[交流]
關(guān)于洋蔥表皮亞細(xì)胞定位的問題～～ 已有7人參與
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構(gòu)建好了GFP fusion載體，本來是要用基因槍的，后面發(fā)現(xiàn)做不了 問問能不能用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法做，我自己試試一下，方法如下，但是貌似沒有侵染進(jìn)去，請(qǐng)問需要怎么改進(jìn)？ 2.8盤1洋蔥表皮預(yù)培養(yǎng) 用鑷子撕取洋蔥里表皮 1cm2小塊放在MS培養(yǎng)基上，28℃預(yù)培養(yǎng)5h。 2.83)侵染液制備 將菌液加入含抗生素的LB培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜，5000離心5分鐘，收集菌體，LB重懸浮，分光光度計(jì)測(cè)定菌液濃度，其濃度調(diào)至OD＝1左右。 2.83)浸染 將上述菌液倒入到預(yù)培養(yǎng)培養(yǎng)基中，泡 30min，期間搖動(dòng)數(shù)次。倒去菌液，將洋蔥表皮置于滅菌濾紙上吸干表面菌液。 接入共培養(yǎng)培養(yǎng)基（MS培養(yǎng)基加AS），28℃暗培養(yǎng)2天觀察。 |
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shaquila
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6樓2014-06-19 18:05:07
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