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細(xì)菌16s pcr原液測(cè)序問(wèn)題
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請(qǐng)教各位大蝦~~~我用的引物是27f和1492r,p的是細(xì)菌的16s全長(zhǎng),然后原液測(cè)序,雙向測(cè)通后拼接。測(cè)序公司每次都能測(cè)出的我1492r,每次都是告訴我27f測(cè)不通,每次都是測(cè)到500bp左右以后斷掉,我看了峰圖,1492r很穩(wěn)定也很好,飄峰一般都是在800bp以后了,但是就是27f總是測(cè)不通,到500bp突然就雜峰很大很多然后就斷掉。 pcr的條帶也是很明亮沒(méi)有雜帶的,能是什么原因呢???已經(jīng)測(cè)了很多樣品了,大部分的27f都測(cè)不通,急切的求指教啊~~ |
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