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細(xì)菌16s pcr原液測(cè)序問題
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請(qǐng)教各位大蝦~~~我用的引物是27f和1492r，p的是細(xì)菌的16s全長(zhǎng)，然后原液測(cè)序，雙向測(cè)通后拼接。測(cè)序公司每次都能測(cè)出的我1492r，每次都是告訴我27f測(cè)不通，每次都是測(cè)到500bp左右以后斷掉，我看了峰圖，1492r很穩(wěn)定也很好，飄峰一般都是在800bp以后了，但是就是27f總是測(cè)不通，到500bp突然就雜峰很大很多然后就斷掉。 pcr的條帶也是很明亮沒有雜帶的，能是什么原因呢？？？已經(jīng)測(cè)了很多樣品了，大部分的27f都測(cè)不通，急切的求指教啊~~ |
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