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小木蟲論壇-學術(shù)科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 酶切條帶模糊?
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酶切條帶模糊?
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如題，酶切后跑電泳，110V左右，55mA左右，30min左右，酶切條帶分別為120，100bp左右，最近感覺酶切的條帶電泳后總感覺不太清晰（如下圖所示：M-MARKER,1,2,3分別代表三種不同基因型，1包含酶切位點，3不含酶切位點，2為雜和子，其中3大小與PCR產(chǎn)物大小一樣，電泳液也重新?lián)Q過了，似乎沒啥變化，（PS:最近電泳儀有些奇怪，以前都是恒壓工作模式，最近變成了恒流模式，電壓比以往小10多伏）。 求教，該怎么辦呢？  |
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西瓜
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【答案】應助回帖
xwsooo(金幣+1): 2011-06-23 22:37:23
xwsooo(金幣+1): 這個是給第二個帖子的金幣：） 2011-06-24 09:51:49
xwsooo(金幣+1): 這個是給第二個帖子的金幣：） 2011-06-24 09:51:49
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電泳時，由于電泳體系是不斷變化的，恒壓或恒流只能選擇其一。選擇恒壓時，電流一般會隨著電泳不斷增大。當電流大于設定的最大值時，電泳儀會自動轉(zhuǎn)成恒流模式。這是電泳儀的保護機制。 看電泳效果如何，看Marker就可以了（你的酶切產(chǎn)物我是沒看出什么不妥）。后面兩張圖marker都跑彎了，我覺得還是緩沖液的問題，有沒有重新配緩沖液試過呢？ 另外，也可以查看下電泳儀的電流參數(shù)，看是不是比以前設的更小了�；蛘吒纱嗍怯腥擞珊銐焊某闪撕懔鳌� |
2樓2011-06-23 19:35:54
3樓2011-06-23 22:38:41
西瓜
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4樓2011-06-23 23:25:06
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