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酶切的時候,條帶成糊狀,一片。
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用fermentas的酶 進(jìn)行酶切,條帶成糊狀,一片。小試如此,大切也是如此。 原來質(zhì)粒是pET-28a的,7700bp,酶切后,HInd3,Xba1,Nde1,Sca1(單酶切位點(diǎn))酶都用過,條帶跑到了幾百bp的位置,和未酶切的一起電泳的對比(沒有存圖)相距很遠(yuǎn)。如果是大切的話,就是一段糊狀的條帶。請問是什么原因? 酶污染了DNA酶了?還是怎么? [ Last edited by sayfxxk2u on 2011-9-2 at 22:08 ] |
| 如果用了多種酶切后結(jié)果還是這樣的話,酶污染的可能性不是太大,如果不放心可以換支新的酶試一下。再就是對質(zhì)粒進(jìn)行一下鑒定,確保是你要的質(zhì)粒,根據(jù)圖譜找上幾個多酶切位點(diǎn)切一下就行。然后就是調(diào)整一下酶切條件及電泳條件,大切模糊的話可能和上樣量有關(guān),建議縮小一下上樣量看看 |

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