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[求助]
酶切的時(shí)候，條帶成糊狀，一片。
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用fermentas的酶 進(jìn)行酶切，條帶成糊狀，一片。小試如此，大切也是如此。 原來(lái)質(zhì)粒是pET-28a的，7700bp，酶切后，HInd3，Xba1，Nde1，Sca1（單酶切位點(diǎn)）酶都用過(guò)，條帶跑到了幾百bp的位置，和未酶切的一起電泳的對(duì)比（沒(méi)有存圖）相距很遠(yuǎn)。如果是大切的話(huà)，就是一段糊狀的條帶。請(qǐng)問(wèn)是什么原因？ 酶污染了DNA酶了？還是怎么？ [ Last edited by sayfxxk2u on 2011-9-2 at 22:08 ] |
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yguang
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3樓2011-09-03 00:24:12
【答案】應(yīng)助回帖
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dhd997(金幣+3): 最近很活躍啊 2011-09-03 07:44:49
sayfxxk2u(金幣+1): 謝謝 2011-09-05 13:34:01
sayfxxk2u(金幣+4): 2011-09-05 19:43:12
dhd997(金幣+3): 最近很活躍啊 2011-09-03 07:44:49
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sayfxxk2u(金幣+4): 2011-09-05 19:43:12
| 如果用了多種酶切后結(jié)果還是這樣的話(huà)，酶污染的可能性不是太大，如果不放心可以換支新的酶試一下。再就是對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行一下鑒定，確保是你要的質(zhì)粒，根據(jù)圖譜找上幾個(gè)多酶切位點(diǎn)切一下就行。然后就是調(diào)整一下酶切條件及電泳條件，大切模糊的話(huà)可能和上樣量有關(guān)，建議縮小一下上樣量看看 |
2樓2011-09-02 23:47:54
半導(dǎo)體與導(dǎo)體
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4樓2011-09-03 08:16:40
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5樓2011-09-03 09:35:23
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