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孢子懸浮液的制備和濃度調(diào)制
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| 要制作霉菌的孢子懸浮液,請問有沒有人做過?我看有人把菌分別接到斜面和麩曲培養(yǎng)基中,在刮孢子制成孢子懸浮液。請問兩者有什么區(qū)別?還有孢子懸浮液的濃度用分光光度計調(diào)節(jié)的具體方法是什么呢?本人剛剛開始接觸霉菌,這方面的知識相當(dāng)貧乏。 |
菌種 |
金蟲 (小有名氣)
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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一般的文獻(xiàn)中獲得孢子懸浮液都是沖洗斜面得到的,如果在斜面上正常不是足夠好而在麩皮培養(yǎng)基中生長良好的話也可以用麩皮培養(yǎng)的,如果斜面上生長已經(jīng)足夠好可以獲得大量的袍子就沒必要用麩皮培養(yǎng)了。 如果是在斜面上培養(yǎng),就在斜面中加入20毫升左右的無菌生理鹽水,然后搖晃充分沖洗孢子,然后在超凈工作臺中將沖洗液用一層無菌脫脂棉進(jìn)行過濾(因為沖洗液中含有一定量的菌絲),將袍子濾液中加入幾顆無菌玻璃球,然后搖床震蕩使成團(tuán)的孢子打散。如果是用麩皮培養(yǎng)的話,也需要在培養(yǎng)后的麩皮中加入一定量的無菌生理鹽水,然后過濾,其他步驟同剛才所述。 要計算孢子數(shù)量并調(diào)節(jié)孢子濃度的話,我建議還是直接使用血球計數(shù)板,利用油鏡直接觀察計數(shù),觀察效果很明顯的。用分光光度計測的話,您首先需要調(diào)制已知濃度的不同級別的孢子懸浮液做出一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,而且比濁法受儀器本身,天氣氣候等的影響較大,今天的結(jié)果和第二天的都存在差別,最好還是用血球計數(shù)板。 祝你順利 |

銀蟲 (小有名氣)

新蟲 (初入文壇)
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