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[求助]
孢子懸浮液的制備和濃度調(diào)制
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| 要制作霉菌的孢子懸浮液，請(qǐng)問有沒有人做過��？我看有人把菌分別接到斜面和麩曲培養(yǎng)基中，在刮孢子制成孢子懸浮液。請(qǐng)問兩者有什么區(qū)別？還有孢子懸浮液的濃度用分光光度計(jì)調(diào)節(jié)的具體方法是什么呢？本人剛剛開始接觸霉菌，這方面的知識(shí)相當(dāng)貧乏。 |
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3樓2011-06-29 16:23:36
2樓2011-06-29 15:52:22
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
amisking(金幣+3, EPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-06-29 18:08:24
amisking(金幣+3, EPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-06-29 18:08:24
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是這樣的，一個(gè)斜面，你做第一次得時(shí)候就用50ml水來洗孢子，得到的孢子懸浮液你在稀釋一定倍數(shù)后用血球板計(jì)數(shù)器來數(shù)數(shù)，這樣你就大概清楚一個(gè)斜面用50ml水洗了后的濃度是多少，那么這個(gè)濃度你可以作為你的經(jīng)驗(yàn)，以后都用50ml水來洗斜面，你需要什么濃度你就稀釋多少倍啊，呵呵 ，因?yàn)樾泵嬉话闱闆r下是你自己接的話，孢子數(shù)差不到哪里去 |
4樓2011-06-29 17:35:55
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rainwander(金幣+3): 鼓勵(lì)交流 2011-06-29 22:41:21
rainwander(金幣+3): 鼓勵(lì)交流 2011-06-29 22:41:21
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一般的文獻(xiàn)中獲得孢子懸浮液都是沖洗斜面得到的，如果在斜面上正常不是足夠好而在麩皮培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好的話也可以用麩皮培養(yǎng)的，如果斜面上生長(zhǎng)已經(jīng)足夠好可以獲得大量的袍子就沒必要用麩皮培養(yǎng)了。 如果是在斜面上培養(yǎng)，就在斜面中加入20毫升左右的無菌生理鹽水，然后搖晃充分沖洗孢子，然后在超凈工作臺(tái)中將沖洗液用一層無菌脫脂棉進(jìn)行過濾（因?yàn)闆_洗液中含有一定量的菌絲），將袍子濾液中加入幾顆無菌玻璃球，然后搖床震蕩使成團(tuán)的孢子打散。如果是用麩皮培養(yǎng)的話，也需要在培養(yǎng)后的麩皮中加入一定量的無菌生理鹽水，然后過濾，其他步驟同剛才所述。 要計(jì)算孢子數(shù)量并調(diào)節(jié)孢子濃度的話，我建議還是直接使用血球計(jì)數(shù)板，利用油鏡直接觀察計(jì)數(shù)，觀察效果很明顯的。用分光光度計(jì)測(cè)的話，您首先需要調(diào)制已知濃度的不同級(jí)別的孢子懸浮液做出一條標(biāo)準(zhǔn)曲線，而且比濁法受儀器本身，天氣氣候等的影響較大，今天的結(jié)果和第二天的都存在差別，最好還是用血球計(jì)數(shù)板。 祝你順利 |
5樓2011-06-29 19:13:01
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