 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4608 | 回復(fù): 19 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 MicEPI ，點擊這里進行查看 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
uulove37金蟲 (著名寫手)
|
[求助]
微生物降解纖維素的纖維素酶活如何測？
|
||
| 求助：纖維素降解過程中的的纖維素酶活怎么測��？最好有具體的步驟，各種藥品的用量也都越清楚越好！謝謝 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 實驗技術(shù) |
» 猜你喜歡
初試 317
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
279分求調(diào)劑 一志愿211
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
286求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
279求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
299求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
330求調(diào)劑0854
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
299求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
286分人工智能專業(yè)請求調(diào)劑愿意跨考！
已經(jīng)有5人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 纖維素酶
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 只能利用葡萄糖（單糖）的酵母，不能利用蔗糖或多糖、
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【轉(zhuǎn)帖】三種生物燃料技術(shù)及其發(fā)展
已經(jīng)有28人回復(fù)
- 【求助/交流】微生物纖維素酶活測定
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【有獎活動】回憶2010考研專業(yè)課題目
已經(jīng)有54人回復(fù)
- 【交流/求助】關(guān)于纖維素酶測酶活的問題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 微生物學考研資料1(沈萍版同步）免幣分享
已經(jīng)有67人回復(fù)
mengxibio
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 散金: 10
- 紅花: 2
- 帖子: 78
- 在線: 47.5小時
- 蟲號: 1092654
- 注冊: 2010-09-08
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學
5樓2011-06-30 22:28:03
yhjcwangyw
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- MicEPI: 4
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 8936.8
- 散金: 215
- 紅花: 22
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 769
- 在線: 253.6小時
- 蟲號: 1243873
- 注冊: 2011-03-24
- 性別: GG
- 專業(yè): 食品科學基礎(chǔ)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
uulove37(金幣+5): 2011-06-30 20:39:06
wolfebst(金幣+5, EPI+1): 鼓勵 2011-06-30 22:00:53
uulove37(金幣+5): 2011-06-30 20:39:06
wolfebst(金幣+5, EPI+1): 鼓勵 2011-06-30 22:00:53
|
我當時的測定方法 主要試劑配制方法 1．硝基水楊酸（DNS）試劑[91]: 稱取酒石酸鉀鈉91g，溶于500ml蒸餾水中，加熱至50℃溶解，再依次加入3，5-二硝基水楊酸(DNS)3.5g，NaOH20g，苯酚2.5g，無水亞硫酸鈉2.5g，攪拌至完全溶解。冷卻后用蒸餾水定容至1000ml，儲于棕色瓶中4℃保存，放置1周左右后使用，使用前過濾。 2．1mg/lml標準葡萄糖溶液：精確稱取105℃烘至恒重的無水葡萄糖(分析純)1.000g，用蒸餾水溶解后，定容至1000ml容量瓶中備用。 3．1%CMC底物溶液：1克CMC加熱溶化于100m1pH值4.8，0.lmol/L的檸檬酸一檬酸鈉緩沖液中。 4．pH值4.8，0.lmol/L的檸檬酸一檸檬酸鈉緩沖液: 0.lmol/L檸檬酸：含檸檬酸•H2O21.01g/L。 0.lmol/L的檸檬酸三鈉：含檸檬酸三鈉•2H2O 29.4g/L。 0.lmol/L的檸檬酸40ml與0.lmol/L的檸檬酸三鈉60.6ml混合即可。 5. KH2PO4-Na2HPO緩沖液（pH7.0） 取 4.539 克 KH2PO4 和 11.939 克 Na2HPO4•12H2O，溶解于蒸餾水中，定容至1000mL，用 0.5mol/L KH2PO4 或 0.5mol/L Na2HPO4 調(diào)至 pH7.0。 3，5-二硝基水楊酸（DNS）法測定還原糖 測定原理 纖維素經(jīng)纖維素酶水解后生成還原糖，還原糖能將3，5—二硝基水楊酸（DNS）中硝基還原成氨基，溶液變?yōu)槌壬陌被衔铮?3—氨基—5—二硝基水楊酸)，在一定的還原糖濃度范圍內(nèi)，橙色的深度與還原糖的濃度成正比，從而可推算出溶液中還原糖的含量。 葡萄糖標準曲線繪制 取七只25ml的比色管，分別編號，然后按下表加入試劑后，540nm測定吸光值，繪制葡萄糖標準曲線。 葡萄糖標準曲線繪制 Table2-3 Glucose standard curve drawing 項目 管號 0 1 2 3 4 5 6 葡萄糖標樣（ml） 0 1.5 2 2.5 3 3.25 3.5 含糖總量（mg） 0 1.5 2 2.5 3 3.25 3.5 DNS（ml） 3 3 3 3 3 3 3 加水至10ml刻度線 沸水煮沸10min，使其充分反應(yīng)后，流水快速冷卻 定容 25 25 25 25 25 25 25 纖維素酶酶活測定 1 濾紙酶活測定 以濾紙為底物，在一定反應(yīng)條件(pH4.8，50℃，恒溫lh)下，以水解反應(yīng)中l(wèi)ml纖維素酶液lmin催化纖維素生成lµg葡萄糖為1個濾紙酶活單位，以U表示，該酶活力代表了纖維素酶的三種酶組分協(xié)同作用后的總酶活。測定方法為：取1ml適當稀釋的酶液，加入pH值為4.8，0.lmol/L的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液2ml，再加入50土0.5mg濾紙(1cmx6cm)一條，于50℃保溫酶解反應(yīng)1小時 (先預(yù)熱5分鐘)，然后加入DNS顯色液3ml，放入已沸騰的水中沸水浴10min，流水冷卻后在540nm下測吸光度。同時用100℃煮沸10min后失活的酶液作為空白對照。根據(jù)吸光度從葡萄糖標準曲線中查出相應(yīng)的葡萄糖含量，根據(jù)生成的葡萄糖克數(shù)計算出酶活值。濾紙酶活按下面公式計算:：X=(WxNxMx1000)/T X：濾紙酶酶活力，單位U/ml；W：從葡萄糖標準曲線中查得的葡萄糖的濃度(mg/ml)。 M：反應(yīng)后樣品總體積(ml)；N：酶液稀釋倍數(shù)；T:反應(yīng)時間(min)。 2 CMC酶活測定 以1%CMC溶液為底物，在一定反應(yīng)條件(pH4.8，50℃，恒溫30min)下，以水解反應(yīng)中，lml纖素酶液lmin催化纖維素生成lµg葡萄糖為1個CMC酶活單位，以U表示。該酶活代表了纖維素酶內(nèi)切葡聚糖酶活力。測定方法為：取1ml適當稀釋的酶液，加入1%CMC底物溶液2ml，50℃保溫酶解反應(yīng)30min(先預(yù)熱5分鐘然)后加入DNS顯色液3ml，放入已沸騰的水中沸水浴10min，流水冷卻后在540nm下測吸光度。同時用100℃煮沸10min后失活的酶作為空白對照。根據(jù)吸光度從葡萄糖標曲線中查出相應(yīng)的葡萄糖含量，根據(jù)生成的葡萄糖克數(shù)計算出CMC酶活值。 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
siwonyy
2樓2011-06-30 09:39:24
mengxibio
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 散金: 10
- 紅花: 2
- 帖子: 78
- 在線: 47.5小時
- 蟲號: 1092654
- 注冊: 2010-09-08
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
uulove37(金幣+5): 2011-06-30 20:45:57
wolfebst(金幣+3): 鼓勵 2011-06-30 22:01:23
uulove37(金幣+5): 2011-06-30 20:45:57
wolfebst(金幣+3): 鼓勵 2011-06-30 22:01:23
|
篩選用剛果紅，測酶活用DNS法。 具體方法參見： http://wenku.baidu.com/view/6fb4b852ad02de80d5d84005.html 話說纖維素酶是我本科時某幾個實驗室做的課題，lz是哪個學校的啊 |
3樓2011-06-30 11:10:01
uulove37
金蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1716.8
- 散金: 554
- 紅花: 1
- 帖子: 1556
- 在線: 62.4小時
- 蟲號: 1019945
- 注冊: 2010-05-16
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學
4樓2011-06-30 20:46:41
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 302求調(diào)劑 +11 | 呼呼呼。。。。 2026-03-17 | 11/550 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 310求調(diào)劑 +3 | baibai1314 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
[考研] 化學求調(diào)劑 +4 | 臨澤境llllll 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿重慶大學085700資源與環(huán)境專碩，總分308求調(diào)劑 +3 | 墨墨漠 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 354求調(diào)劑 +5 | Tyoumou 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑求學校推薦 +3 | 伯樂29 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 323求調(diào)劑 +3 | 洼小桶 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] A區(qū)線材料學調(diào)劑 +5 | 周周無極 2026-03-20 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 本人考085602 化學工程 專碩 +19 | 不知道叫什么！ 2026-03-15 | 21/1050 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | @taotao 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工專碩調(diào)劑 +7 | heming3743 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 招收調(diào)劑碩士 +4 | lidianxing 2026-03-19 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 324分 +10 | llllkkkhh 2026-03-18 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 0703化學調(diào)劑 +5 | pupcoco 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工求調(diào)劑 +6 | 緒幸與子 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語六級551，有科研經(jīng)歷 +4 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-16 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 化學工程321分求調(diào)劑 +15 | 大米飯！ 2026-03-15 | 18/900 |
|
|
|
[考博] 26申博 +4 | 八6八68 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +4 | 太陽花天天開心 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 070305求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-14 | 4/200 |
|