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清新夏青新蟲 (小有名氣)
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蛋白純化怎么去除核酸
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| 最近做的蛋白是個(gè)核蛋白,結(jié)合核酸特別強(qiáng),試過核酸酶,但效果不太好,請(qǐng)問有沒有大俠知道還有什么去除核酸的辦法 |
【分子生物】EPI帖 | 蛋白質(zhì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn) |
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1、根據(jù)你的蛋白的性質(zhì),選擇合適的介質(zhì)和條件,想辦法把蛋白結(jié)合在柱子上,(有tag的話用這個(gè)方法最好了),然后用高鹽(0.5-3M NaCl)洗,一般會(huì)洗下來一個(gè)峰,就是被洗下來的核酸了。 2、試試在高鹽條件下加Mn2+,因?yàn)楦啕}可以讓核酸和蛋白分離,而Mn2+對(duì)核酸沉淀有一定的效果。 但是要十分小心的是,這類蛋白本身的天然性質(zhì)就是要結(jié)合核酸的,有的時(shí)候核酸去除干凈了,蛋白也沉淀了,所以沒那么容易,很多小條件要結(jié)合你的蛋白自己去摸索。 |
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