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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 蛋白純化怎么去除核酸
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清新夏青新蟲 (小有名氣)
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[求助]
蛋白純化怎么去除核酸
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| 最近做的蛋白是個核蛋白，結合核酸特別強，試過核酸酶，但效果不太好，請問有沒有大俠知道還有什么去除核酸的辦法 |
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 【分子生物】EPI帖 | 蛋白質(zhì)生物學實驗經(jīng)驗 |
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xhjggl
木蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學
4樓2011-06-30 23:27:17
【答案】應助回帖
★ ★ ★
amisking(金幣+3, EPI+1): 鼓勵應助 2011-06-30 21:09:30
清新夏青(金幣+3): 2011-07-04 13:19:09
amisking(金幣+3, EPI+1): 鼓勵應助 2011-06-30 21:09:30
清新夏青(金幣+3): 2011-07-04 13:19:09
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1、根據(jù)你的蛋白的性質(zhì)，選擇合適的介質(zhì)和條件，想辦法把蛋白結合在柱子上，（有tag的話用這個方法最好了），然后用高鹽（0.5-3M NaCl）洗，一般會洗下來一個峰，就是被洗下來的核酸了。 2、試試在高鹽條件下加Mn2+，因為高鹽可以讓核酸和蛋白分離，而Mn2+對核酸沉淀有一定的效果。 但是要十分小心的是，這類蛋白本身的天然性質(zhì)就是要結合核酸的，有的時候核酸去除干凈了，蛋白也沉淀了，所以沒那么容易，很多小條件要結合你的蛋白自己去摸索。 |
2樓2011-06-30 19:10:23
3樓2011-06-30 19:12:31
5樓2011-07-01 09:07:06
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