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全血DNA提取中用到的TE Buffer 能否用無菌注射用水代替？ 已有4人參與
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| 全血DNA提取中用到的TE Buffer 能否用無菌注射用水代替？ |
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1949stone(金幣+3): 真是很激烈了 啊支持u 2011-07-03 18:37:48
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哈哈，歡迎踢館同時也學(xué)習(xí)了~~~~~~~ 2010版的藥典也翻過了，還是資料查的不夠多。 加生理鹽水、葡萄糖所指的是點滴瓶裝水，所指的并不是注射用水，屬于我個人的概念混淆。 哇哈哈做液相比超純水差不多，可以說物美價廉。 藥典版本變化雖然不大，但是規(guī)定還是挺硬性的。注射用水就是純化水蒸餾所得，純化水沒有硬性規(guī)定純化方式，就是說，無論是超純水還是超超超純水，要成為注射用水，必須經(jīng)過蒸餾~~~ 中國藥典2010版 附錄ⅩⅥ 制藥用水 水是藥物生產(chǎn)中用量大、使用廣的一種輔料，用于生產(chǎn)過程及藥物制劑的制備。 本版藥典中所收載的制藥用水，因其使用的范圍不同而分為飲用水、純化水、注射用水及滅菌注射用水。一般應(yīng)根據(jù)各生產(chǎn)工序或使用目的與要求選用適宜的制藥用水。藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)確保制藥用水的質(zhì)量符合預(yù)期用途的要求。 制藥用水的原水通常為飲用水。 制藥用水的制備從系統(tǒng)設(shè)計、材質(zhì)選擇、制備過程、貯存、分配和使用均應(yīng)符合藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范的要求。制水系統(tǒng)應(yīng)經(jīng)過驗證，并建立日常監(jiān)控、檢測和報告制度，有完善的原始記錄備查制藥用水系統(tǒng)應(yīng)定期進(jìn)行清洗與消毒，消毒可以采用熱處理或化學(xué)處理等方法。采用的消毒方法以及化學(xué)處理后消毒劑的去除應(yīng)經(jīng)過驗證。 飲用水 為天然水經(jīng)凈化處理所得的水，其質(zhì)量必須符合現(xiàn)行中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》 飲用水可作為藥材凈制時的漂洗、制藥用具的粗洗用水。除另有規(guī)定外， 也可作為藥材的提取溶劑。 純化水 為飲用水經(jīng)蒸餾法、離子交換法、反滲透法或其他適宜的方法制備的制藥用水。不含任何附加劑，其質(zhì)量應(yīng)符合二部純化水項下的規(guī)定。 純化水可作為配制普通藥物制劑用的溶劑或試驗用水；可作為中藥注射劑、滴眼劑等滅菌制劑所用藥材的提取溶劑；口服、外用制劑配制用溶劑或稀釋劑；非滅菌制劑用器具的精洗用水。也用作非滅菌制劑所用藥材的提取溶劑。純化水不得用于注射劑的配制與稀釋。 純化水有多種制備方法，應(yīng)嚴(yán)格監(jiān)測各生產(chǎn)環(huán)節(jié)，防止微生物污染，確保使用點的水質(zhì)。 注射用水 為純化水經(jīng)蒸餾所得的水，應(yīng)符合細(xì)菌內(nèi)毒素試驗要求。注射用水必須在防止細(xì)菌內(nèi)毒素產(chǎn)生的設(shè)計條件下生產(chǎn)、貯藏及分裝。其質(zhì)量應(yīng)符合注射用水項下的規(guī)定。 注射用水可作為配制注射劑、滴眼劑等的溶劑或稀釋劑及容器的精洗。為保證注射用水的質(zhì)量，應(yīng)減少原水中的細(xì)菌內(nèi)毒素，監(jiān)控蒸餾法制備注射用水的各生產(chǎn)環(huán)節(jié)，并防止微生物的污染。應(yīng)定期清洗與消毒注射用水系統(tǒng)。注射用水的儲存方式和靜態(tài)儲存期限應(yīng)經(jīng)過驗證確保水質(zhì)符合質(zhì)量要求，例如可以在80℃以上保溫或70℃以上保溫循環(huán)或4℃以下的狀態(tài)下存放。 滅菌注射用水 為注射用水按照注射劑生產(chǎn)工藝制備所得。不含任何添加劑。主要用于注射用滅菌粉末的溶劑或注射劑的稀釋劑。其質(zhì)量符合滅菌注射用水項下的規(guī)定。 滅菌注射用水灌裝規(guī)格應(yīng)適應(yīng)臨床需要，避免大規(guī)格、多次使用造成的污染。 附藥典2010版1484頁pdf說明 |
6樓2011-07-03 17:02:14
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樓上兩位大神已經(jīng)證明，無菌注射用水能保證純度和無菌，我就說下TE buffer吧。 TE buffer的成分就是Tris和EDTA。Tris是一種常用的pH緩沖液；EDTA可以螯合陽離子，如二價鎂離子，而鎂離子是很多酶活性所必需的（如DNA酶），所以EDTA可以抑制DNA酶的活性。 我不知道全血DNA提取的具體步驟如何，所以能不能用無菌水代替，還要看TE在里面起什么作用。 TE無非就是提供一個特定的pH環(huán)境（可用HCl調(diào)節(jié)pH），以及抑制核酸酶的活性。如果用來懸浮樣品，或者最后提完后溶解DNA，那完全可以用無菌水代替。就像見裂解法提質(zhì)粒時的溶液1，成分是葡萄糖+tris+EDTA，作用無非就是把菌體懸浮起來，完全可以用水代替。提完質(zhì)粒后，最后加TE溶解DNA，這一步也可以用水代替，不過TE的弱堿性環(huán)境更適于DNA的長期保存。 當(dāng)然，如果需要特殊的pH，或者實驗要求很嚴(yán)格，那就不能用水代替了。 |
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12樓2011-07-03 19:19:44
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2樓2011-07-02 21:52:36
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護(hù)士一敲就開的是安瓿管，一般安瓿管都是裝安瓿水針劑的。很多，比如慶大霉素針劑、青霉素針劑。 中國藥典2010版沒有規(guī)定滅菌注射用水的性質(zhì)，不管是離子交換、反滲透、雙蒸水，符合如下標(biāo)準(zhǔn)即可： 【檢查】 pH值 取本品100ml，加飽和氯化鉀溶液0.3ml，依法測定（附錄Ⅵ H），pH值應(yīng)為5.0～7.0。 氨 取本品50ml，加堿性碘化汞鉀溶液2ml，放置15分鐘，如顯色，與標(biāo)準(zhǔn)氯化銨溶液(取氯化銨31.5mg，加無氨水適量使溶解并稀釋至1000ml)1.0ml，加無氨水48ml與堿性碘化汞鉀溶液2ml制成的對照液比較，不得更深(0.000 02%)。 重金屬 照純化水項下的方法檢查，應(yīng)符合規(guī)定�！� [增訂] 【檢查】電導(dǎo)率 應(yīng)符合規(guī)定（附錄）。 總有機碳、鋁鹽 照純化水項下的方法檢查，應(yīng)符合規(guī)定。 都是一些常規(guī)的檢測，純度未必好。 而注射用水，一般會標(biāo)注，XXX用水，原因不說了。如果未標(biāo)，則應(yīng)符合藥典規(guī)定。 建議：不推薦使用注射用水。 |
4樓2011-07-03 00:39:05
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呦，來踢館了， hoho 注射用水指符合中國藥典注射用水項下規(guī)定的水。注射用水為蒸餾水或去離子經(jīng)蒸餾所得的水，故又稱重蒸餾水。 純化水與注射用水二者的區(qū)別還在于制水工藝，純化水的制備工藝可以有各種選擇，但各國藥典對注射用水的制備工藝均有限定條件，如美國藥典明確規(guī)定注射用水的制備工藝只能是蒸餾及反滲透，中國藥典則規(guī)定注射用水的生產(chǎn)工藝必須是蒸餾。 純化水系統(tǒng)可采用反滲透，而注射用水系統(tǒng)則更多地使用蒸餾法，蒸餾水機往往是純化水系統(tǒng)分配循環(huán)回路（用水回路）中的主要用水點。從制藥用水源水的選擇上，美國藥典有較大的靈活性，按其規(guī)定，注射用水可以由飲用水經(jīng)蒸餾或反滲透制得， 滅菌注射用水 【標(biāo)準(zhǔn)來源】 【藥品名稱】 通用名：滅菌注射用水曾用名：商品名：英文名：SterileWaterforInjection漢語拼音：MiejunZhusheyongShui本品成份為：注射用水。分子式：H2O分子量：18.02 注射用水是指不含熱原，專供注射的重蒸餾水和高純水。注射用水與純化水的區(qū)別就在于無熱原。注射用水再經(jīng)滅菌得滅菌注射用水，作為粉針的溶劑或注射劑的稀釋劑。 注射用水的質(zhì)量要求 注射用水的質(zhì)量要求較為嚴(yán)格，除一般蒸餾水的檢查應(yīng)符合藥典規(guī)定外，還必須通過熱原試驗，尤其在制備靜脈注射劑時注射用水的質(zhì)量要求更應(yīng)嚴(yán)格控制�！吨袊幍洹罚�2000年版）規(guī)定：每ml中內(nèi)毒素含量不得超過0.5EU，pH要求5.0-7.0，氨含量不超過0.00002%. 從制備工藝上看，是H2O，從分子式上看，也是H2O，注射用水絕對不會是葡萄糖溶液或生理鹽水。 超純水，純水的對離子，即無機雜質(zhì)的去除較充分，因此有很高的阻抗，超純水阻抗較純水更高，而注射用水，相同情況下還要強調(diào)對生物雜質(zhì)，有機雜質(zhì)的去除，通過反滲透法，EDI法，而且為除去反滲透無法除去的內(nèi)毒素，還要有蒸餾工序。 注射用水用到普通的分子實驗，PCR，核酸提取啥的，問題不大，當(dāng)然能用更好的純水自然更好，普通的實驗，臨時替代一下，問題真的不大 而高效液相等精密儀器使用的一定是超純水，離子啊，有機雜質(zhì)啊，要求會更高 [ Last edited by cdl007 on 2011-7-3 at 11:31 ] |
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