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zsa513新蟲 (初入文壇)
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[交流]
請(qǐng)問兩個(gè)關(guān)于denature PAGE的問題~ 已有2人參與
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我用denature PAGE(urea)跑DNA, 感覺遷移率非常的慢，這是正常的么？我平時(shí)跑蛋白頂多1個(gè)小時(shí)，這樣感覺至少要2，3個(gè)小時(shí)，我跑的DNA片段很小20-70bp，用的12%的膠，請(qǐng)問大牛大概要跑多長時(shí)間��？ 還有一個(gè)問題，就是我跑覺的時(shí)候，current的電壓會(huì)隨著時(shí)間變動(dòng)，我已經(jīng)選了電泳constant了。以前從來不會(huì)變的。這是膠或者buffer有問題么？還是電泳儀mode的問題？還是說跑這種電泳就是會(huì)這樣？ 求大牛解釋！多謝！ |
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zsa513
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5樓2011-07-04 11:32:49
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2樓2011-07-03 15:54:40
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3樓2011-07-04 01:51:15
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
dhd997(金幣+3): 2011-07-04 18:06:56
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
dhd997(金幣+3): 2011-07-04 18:06:56
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緩沖液的問題或者是電泳儀設(shè)定的問題。 電泳液的體系是隨著電泳的進(jìn)行是不斷變化的，可以設(shè)定恒壓或者恒流，但是恒壓時(shí)，電流是隨著電泳進(jìn)行不斷變大的，反之亦然。 電泳儀有保護(hù)功能，設(shè)定恒壓時(shí)，設(shè)定的電流為允許的最大電流，當(dāng)電流超過這個(gè)最大值時(shí)會(huì)自動(dòng)切換成恒流，此時(shí)隨著電泳進(jìn)行變化的就是電壓了。 你看看一般跑DNA時(shí)的電壓是多少，可能是跑蛋白的參數(shù)不適合于DNA，可以把最大電流值設(shè)置大一些。如果參數(shù)設(shè)置沒錯(cuò)，那就是緩沖液不行，重新配緩沖液。 |
4樓2011-07-04 09:46:41
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