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[求助]
測(cè)葡萄糖含量的一般用什么方法？
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Sample Text 麻煩各位，我要測(cè)發(fā)酵液中殘留的葡萄糖含量，但我的微生物本身發(fā)酵會(huì)產(chǎn)生多糖，有沒(méi)有一種方法只能測(cè)葡萄糖，而不會(huì)測(cè)多糖的？謝謝了！ |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
amisking(金幣+3, EPI+1): 辛苦 2011-07-06 22:32:24
一流澗水(金幣+5): 2011-07-11 11:22:46
amisking(金幣+3, EPI+1): 辛苦 2011-07-06 22:32:24
一流澗水(金幣+5): 2011-07-11 11:22:46
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DNS法是測(cè)定還原糖的，不單只葡萄糖，其它還原糖也可以測(cè)，原理是在堿性下將DNS還原生成呈色物質(zhì)。所以如果能確定發(fā)酵液里沒(méi)有其它還原糖才能用，但是即使是自己認(rèn)為沒(méi)有，評(píng)委也會(huì)懷疑的，所以慎用。 GOD法比較專一，葡萄糖在葡萄糖氧化酶(GOD)作用下生成葡萄糖酸和過(guò)氧化氫(H2O2)；然后用過(guò)氧化物酶(POD)催化過(guò)氧化氫，使色原物質(zhì)(4-氨基安替比林)生成醌亞胺，顏色的深淺與葡萄糖濃度成正比。我試過(guò)，與蔗糖、麥芽糖、果糖、淀粉都不顯色，只與葡萄糖顯色。我用這個(gè)方法來(lái)測(cè)定含有糖化酶的發(fā)酵液降解淀粉產(chǎn)生葡萄糖，因?yàn)榘l(fā)酵液里的酶成分不能確定，所以要選用GOD法，不能選用DNS法。 HPLC也可以。將葡萄糖配制成特定濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，跑一個(gè)峰，記錄保留時(shí)間。然后發(fā)酵液跑一次，在相同的保留時(shí)間處就是葡萄糖，峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液相比較就知道濃度了。不過(guò)發(fā)酵液要處理干凈，不能有不溶的雜質(zhì)，先離心，再用0.22微米的濾膜過(guò)濾，不然一根糖柱一萬(wàn)五用一次就廢了。 |
一流澗水
2樓2011-07-06 22:29:14
chengjg
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9樓2011-07-08 20:10:59
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