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tuobaohua榮譽版主 (文壇精英)
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[交流]
菌株16S rDNA同源性分析方法! 已有4人參與
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此部分緊接著幾天前整理出的測序結(jié)果的處理方法之后,有興趣的可做參考! (2)序列同源性比較方法: 1,打開網(wǎng)頁http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi; 2,在網(wǎng)頁的中間部分有個“Basic BLAST”,其下有一個選項“nucleotide blast”; 3,點開“nucleotide blast”,出現(xiàn)一個空白框,上面有一行字“Enter accession number(s),gi(s),or FASTA sequence(s)”,將你的序列復(fù)制到這個空白框中; 4,其他的都不變,不必添加什么。注意網(wǎng)頁中間部分有個Database,選中“Others (nr etc.)”; 5,點擊網(wǎng)頁下部的“BLAST”按鈕,等待數(shù)十秒鐘(不要急,多等一會哈。。,直到網(wǎng)頁中出現(xiàn)一個很大的表格; 6,這個表格就是和你的細(xì)菌的16S rDNA序列相似性很高的序列。 Accession:去掉后面的“.1”就是可以查序列的GenBank登錄號了; Description:對菌株的描述; 7,把那個表格拖過去,會有很長很長一段對每個相似度較高序列的說明,其中在各個序列的前段部分會有以下幾個數(shù)值: Score:提交的序列和搜索出的序列之間的分值,越高說明越相似; Expect:比對的期望值,比對越好,expect越小。一般在核酸層次的比對,expect值小于1e-10時,就算比對很好了,多數(shù)情況下為0; Identities:提交的序列好參比序列的相似性; Gaps:空位,指對不上位的堿基數(shù)目; Strand:鏈的方向,Plus/Minus意味著提交的序列和參比序列是反向互補的;Plus/Plus意味著二者是皆為正向; 8,這樣就可以從那個表格中挑選出一些有代表性的菌株,拷貝其16S rDNA序列,用于進一步的系統(tǒng)發(fā)育樹分析; [ Last edited by tuobaohua on 2011-7-26 at 11:52 ] |
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