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1樓 2011-07-31 09:55:54

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lxj341401

至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

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dhd997(金幣+2): good 2011-07-31 17:51:49
huaren125(金幣+1): 2011-08-01 19:29:38

酵母細(xì)胞壁厚，難破碎，菌落PCR做不出也是正常的，一般是先提取酵母基因組DNA，然后PCR驗(yàn)證。

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2樓2011-07-31 10:29:04

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wlsino

金蟲(chóng) (小有名氣)

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dhd997(金幣+2): 最近很活躍，鼓勵(lì)之 2011-07-31 17:52:07

引用回帖:

1樓: Originally posted by huaren125 at 2011-07-31 09:55:54:
大家好，我最近做了幾次酵母的點(diǎn)擊轉(zhuǎn)化，酵母是畢赤酵母GS115，1.5kv電擊4天左右長(zhǎng)出白色的小菌落，就是沒(méi)有普通的酵母大，我挑取轉(zhuǎn)接到含有G418（0.25mg/ml）YPD培養(yǎng)基中搖了一天后也其中有5管變渾濁啦，但我做菌 ...

最好同時(shí)作陽(yáng)性對(duì)照
雖然當(dāng)時(shí)費(fèi)些功夫，但事后省大麻煩

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3樓2011-07-31 15:12:03

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匿名

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4樓2011-08-01 09:11:40

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huaren125

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1949stone: 祝好運(yùn) 2011-08-01 20:34:03

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5樓2011-08-01 19:30:33

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兔兔yy070330

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wanhscn(金幣+3): 支持交流 2011-09-05 21:46:53

引用回帖:

如果目的片段太大的話(huà)，菌落PCR是驗(yàn)證不到的，要用溶菌酶先處理細(xì)胞，然后用液氮研磨后用苯酚氯仿提取酵母基因組，之后再用通用引物和自己的特異性引物進(jìn)行檢測(cè)。

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6樓2011-09-05 21:29:31

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beer胖

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酵母轉(zhuǎn)化有難度

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7樓2011-09-06 08:33:44

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jingdejun

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以后要做這東西，學(xué)習(xí)了。

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8樓2011-09-06 20:47:48

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