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菜鳥問題：細胞保存在液氮罐液相還是氣相中？
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我們實驗室剛開始做培養(yǎng)細胞的實驗。我們以前都是保存在-76度的冰箱里面，這樣可行嗎？現(xiàn)在我們買了一個Thermo 的CY50900液氮罐，在說明書中是這樣說的： Storing Samples in Vapor Phase 1. Remove the 2 bottom-most cryoboxes from each rack. 2. Measure the height of 2 cryoboxes stacked on top of each other. 3. Fill vessel with liquid nitrogen to the height obtained from step 2 using a yardstick to measure liquid level in vessel. 4. Place racks into vessel without the 2 bottom-most cryoboxes. — Samples are now above the liquid nitrogen and are stored in the vapor phase.— Important—A level monitor should always be used when you store your samples in the vapor phase because of the already low levels of liquid nitrogen. Please refer to page 10 for the correct level monitor for your system. 也就是說細胞要儲存在氣態(tài)中，但是我看網上說的培養(yǎng)技術細胞都是凍存在液相里的。那么到底應該把細胞放在哪里呢？ |
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【答案】應助回帖
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silicare: 金幣+5, BioEPI+1, 應助指數(shù)+1, 謝謝分享 2012-05-02 13:09:27
silicare: 金幣+5, BioEPI+1, 應助指數(shù)+1, 謝謝分享 2012-05-02 13:09:27
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細胞凍存，一般是緩慢降溫；復蘇時則是快速解凍，這樣養(yǎng)出來的細胞狀態(tài)才好 緩慢降溫，我們一般放到凍存管后，先放4度一兩小時，再在-20一兩小時，再轉到-40（或直接置-70）放置數(shù)小時后就可以直接置液氮里了。 一個博士師姐曾分享的方法則是，先降至-20度后，懸在液氮罐用蒸氣降溫，慢慢放低，最后再泡進去。不過比較講技術，因為有一次她降太快了，直接碰到液氮，后來那管細胞復蘇后狀態(tài)就差很多 還有凍存液的用量也可以自己摸索，不一定再用那么多的，畢竟那東西對細胞也是有傷害的。復蘇后也要盡快除去它 一點點經驗分享，我現(xiàn)在轉行了，能分享的也不多，只是一些印象深刻的東西了 |
6樓2012-05-02 12:56:57
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