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菜鳥問題：細(xì)胞保存在液氮罐液相還是氣相中？
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我們實(shí)驗(yàn)室剛開始做培養(yǎng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)。我們以前都是保存在-76度的冰箱里面，這樣可行嗎？現(xiàn)在我們買了一個Thermo 的CY50900液氮罐，在說明書中是這樣說的： Storing Samples in Vapor Phase 1. Remove the 2 bottom-most cryoboxes from each rack. 2. Measure the height of 2 cryoboxes stacked on top of each other. 3. Fill vessel with liquid nitrogen to the height obtained from step 2 using a yardstick to measure liquid level in vessel. 4. Place racks into vessel without the 2 bottom-most cryoboxes. — Samples are now above the liquid nitrogen and are stored in the vapor phase.— Important—A level monitor should always be used when you store your samples in the vapor phase because of the already low levels of liquid nitrogen. Please refer to page 10 for the correct level monitor for your system. 也就是說細(xì)胞要儲存在氣態(tài)中，但是我看網(wǎng)上說的培養(yǎng)技術(shù)細(xì)胞都是凍存在液相里的。那么到底應(yīng)該把細(xì)胞放在哪里呢？ |
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silicare: 金幣+5, BioEPI+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 謝謝分享 2012-05-02 13:09:27
silicare: 金幣+5, BioEPI+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 謝謝分享 2012-05-02 13:09:27
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細(xì)胞凍存，一般是緩慢降溫；復(fù)蘇時則是快速解凍，這樣養(yǎng)出來的細(xì)胞狀態(tài)才好 緩慢降溫，我們一般放到凍存管后，先放4度一兩小時，再在-20一兩小時，再轉(zhuǎn)到-40（或直接置-70）放置數(shù)小時后就可以直接置液氮里了。 一個博士師姐曾分享的方法則是，先降至-20度后，懸在液氮罐用蒸氣降溫，慢慢放低，最后再泡進(jìn)去。不過比較講技術(shù)，因?yàn)橛幸淮嗡堤炝�，直接碰到液氮，后來那管�?xì)胞復(fù)蘇后狀態(tài)就差很多 還有凍存液的用量也可以自己摸索，不一定再用那么多的，畢竟那東西對細(xì)胞也是有傷害的。復(fù)蘇后也要盡快除去它 一點(diǎn)點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)分享，我現(xiàn)在轉(zhuǎn)行了，能分享的也不多，只是一些印象深刻的東西了 |
6樓2012-05-02 12:56:57
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