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Joannena新蟲 (初入文壇)
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[求助]
病毒RNA提取后做RT-PCR
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| 求助：病毒RNA提取后做RT-PCR后有時(shí)目的條帶特別淺，有時(shí)根本P不出來(lái)？求高手指點(diǎn)? |
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博杰沖
金蟲 (小有名氣)
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3樓2011-08-08 09:46:11
adslye
銀蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
Joannena(金幣+1): 謝謝你，我也考慮是RNA的問(wèn)題，但是提了幾遍都是這樣，可能還是細(xì)節(jié)注意不夠吧。我再試試 2011-08-09 23:20:23
silicare(金幣+3): 2011-08-10 12:00:07
Joannena(金幣+1): 謝謝你，我也考慮是RNA的問(wèn)題，但是提了幾遍都是這樣，可能還是細(xì)節(jié)注意不夠吧。我再試試 2011-08-09 23:20:23
silicare(金幣+3): 2011-08-10 12:00:07
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1.用別的，肯定能P出來(lái)的基因進(jìn)行PCR，確認(rèn)cDNA沒(méi)問(wèn)題。 2.確定RNA沒(méi)問(wèn)題。跑個(gè)膠看看條帶完整性，測(cè)下OD比值是否在1.9左右。 3.確認(rèn)反轉(zhuǎn)錄沒(méi)問(wèn)題。這步可以拿別的RNA樣品做個(gè)對(duì)照。比較麻煩，一般也不會(huì)有問(wèn)題�？梢宰詈笈懦�。 4.問(wèn)你身邊的師兄師姐。這是個(gè)小實(shí)驗(yàn)，如果你是新手，可能是不小心操作的問(wèn)題。 |
2樓2011-08-08 08:07:23
dianaofyezi
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4樓2011-08-09 15:20:35
dianaofyezi
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5樓2011-08-09 15:21:10
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