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finding1371銀蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
酵母重組子篩選引物問(wèn)題
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| 見(jiàn)論壇里提及篩選重組子的引物有的說(shuō)用專(zhuān)用檢測(cè)引物，有的說(shuō)一條用特異性引物一條用專(zhuān)用引物。若是一條專(zhuān)用引物和一條特異性引物，但是這兩者的引物長(zhǎng)度差近10個(gè)堿基。退火溫度也相差好遠(yuǎn)，能批嗎，到底是什么樣的情況呢，謝謝大家了 |
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lxj341401
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2樓2011-08-19 13:58:46
finding1371
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西瓜(金幣+4, MolEPI+1): 經(jīng)驗(yàn)很多啊 2011-08-19 23:25:01
西瓜(金幣+4, MolEPI+1): 經(jīng)驗(yàn)很多啊 2011-08-19 23:25:03
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西瓜(金幣+4, MolEPI+1): 經(jīng)驗(yàn)很多啊 2011-08-19 23:25:03
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你可以用煮-凍-煮方法試試，很多人說(shuō)比較簡(jiǎn)單的。 煮-凍-煮法：將1mL菌液2 500 X g離心5 min,棄上清，沉淀中加入500 uL TE懸浮沉淀，2500Xg離心3m in;棄上清，重復(fù)一次，最后沉淀溶于100 uLTE,沸水浴10 min，-20℃冷凍30 min,再次沸水浴10 min, 1 500 X g離心5 min,取上清為模板作PCR。 |
5樓2011-08-19 21:15:30
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