 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3432 | 回復(fù): 13 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
[求助]
通用引物擴(kuò)增細(xì)菌16S rDNA
|
||
|
我用通用引物擴(kuò)增細(xì)菌16S rDNA，直接菌落PCR，我試了7、8次，每次都有700bp左右的的非特異性擴(kuò)增，目的片段也有，在1500bp左右，我老師說他以前一做就出來了，根本沒有非特異性擴(kuò)增，為什么我每次都有呢，請(qǐng)各位蟲友幫幫我~~~PCR體系如下（50uL體系）： 10*Buffer 5UL MgCl2（50mM） 2uL 引物a（10uL） 1.5uL 引物b（10uL） 1.5uL dNTP（10mM） 1uL Taq酶（2U/uL） 1uL 模板 槍頭蘸取一點(diǎn)菌 ddH2O 38uL ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ 94度預(yù)變性5min 94度 45s 56度 45s 72度 90s 30個(gè)循環(huán) 問題到底出在哪里呢？我的退火溫度從55-59度都試過，59度就沒有條帶了，引物從1、1.5、2uL的都試過，預(yù)變性時(shí)間從5、10、12min都試過，還試過把前一次PCR產(chǎn)物取1uL做模板，都有非特異性條帶，為么捏？？？望大蝦不吝賜教，小女先謝謝大家了~~ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
招收生物學(xué)/細(xì)胞生物學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
300求調(diào)劑，材料科學(xué)英一數(shù)二
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
070305高分子化學(xué)與物理 304分求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
289求調(diào)劑
已經(jīng)有13人回復(fù)
-
299求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
一志愿哈爾濱工業(yè)大學(xué)材料與化工方向336分
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
調(diào)劑求院校招收
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
調(diào)劑310
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
一志愿北京理工大學(xué)本科211材料工程294求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- PCR-DGGE的引物設(shè)計(jì)
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 要做DGGE，真菌有沒有通用引物？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 16S rDNA測(cè)序問題
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 16s rDNA 擴(kuò)增引物的選擇
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】細(xì)菌16SDNA的通用引物
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】求助如何設(shè)計(jì)植物rDNA ITS區(qū)的擴(kuò)增引物
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助/交流】土壤采樣及DGGE問題
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 【求助/交流】細(xì)菌鑒定
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 【求助/交流】細(xì)菌16s rDNA 通用引物
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】提取的DNA不經(jīng)過PCR是否可以直接進(jìn)行DGGE
已經(jīng)有7人回復(fù)
7樓2011-08-20 10:27:03
ghost9106
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 149.7
- 帖子: 42
- 在線: 7.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 521999
- 注冊(cè): 2008-03-09
- 專業(yè): 食用真菌學(xué)
2樓2011-08-19 16:31:23
3樓2011-08-19 22:15:20
wqj1988926
金蟲 (正式寫手)
- BioEPI: 2
- 應(yīng)助: 40 (小學(xué)生)
- 金幣: 1222
- 散金: 27
- 紅花: 5
- 帖子: 929
- 在線: 225.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 1156883
- 注冊(cè): 2010-11-27
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
4樓2011-08-20 09:00:12
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 070305高分子化學(xué)與物理 304分求調(diào)劑 +7 | c297914 2026-03-28 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +4 | wei-5 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 壓國家一區(qū)線，求導(dǎo)師收留，有恩必謝！ +7 | 迷人的哈哈 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +8 | 邱gl 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +7 | A child 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿南京航空航天大學(xué)材料學(xué)碩求調(diào)劑 +3 | @taotao 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 086502化學(xué)工程342求調(diào)劑 +6 | 阿姨復(fù)古不過 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 352分 化工與材料 +5 | 海納百川Ly 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +8 | 小木蟲085600 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑推薦 +5 | 清酒714 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +7 | prayer13 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 085602化學(xué)工程求調(diào)劑。
+4
|
平樂樂樂 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +6 | 生如夏花… 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 機(jī)械學(xué)碩310分，數(shù)一英一，一志愿211本科雙非找調(diào)劑信息 +3 | @357 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)調(diào)劑一志愿上海交通大學(xué)336分-本科上海211 +4 | 小魚愛有機(jī) 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 打過很多競(jìng)賽，085406控制工程300分，求調(diào)劑 +3 | askeladz 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 上海電力大學(xué)材料防護(hù)與新材料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室招收調(diào)劑研究生（材料、化學(xué)、電化學(xué)，環(huán)境） +4 | 我愛學(xué)電池 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料/農(nóng)業(yè)專業(yè)，07/08開頭均可，過線就行 +3 | 呵唔哦豁 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[論文投稿] 急發(fā)核心期刊論文 +3 | 賢達(dá)問津 2026-03-23 | 5/250 |
|