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青色的知了木蟲 (小有名氣)
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[求助]
目的片段和T1載體連接后轉(zhuǎn)入感受態(tài)細(xì)胞涂板子總不長(zhǎng)菌……
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代朋友問(wèn)的，不是很懂，希望大家能給點(diǎn)意見，不甚感激 目的片段和T1載體連接后轉(zhuǎn)入感受態(tài)細(xì)胞涂板子總不長(zhǎng)菌……是為什么呢？ |
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金蟲 (小有名氣)
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8樓2012-05-31 08:57:31
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2樓2011-08-26 22:19:29
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3樓2011-08-26 22:28:16
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【答案】應(yīng)助回帖
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dhd997(金幣+3): 鼓勵(lì)交流 2011-08-27 09:26:31
青色的知了(金幣+5): 2011-08-27 19:46:48
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青色的知了(金幣+5): 2011-08-27 19:46:48
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首先排除樓上所指出的問(wèn)題 其次要做好對(duì)照，現(xiàn)在不長(zhǎng)菌落，至少要在做轉(zhuǎn)化的時(shí)候轉(zhuǎn)一個(gè)同你的T-vector相同抗性的質(zhì)粒看看是不是你的感受態(tài)有問(wèn)題了，同時(shí)更精細(xì)的，你需要計(jì)算你的感受態(tài)效率。 如果這些都沒(méi)有問(wèn)題，你應(yīng)該看看你的片段是不是需要加A，或者說(shuō)是不是KOD之類的PCR系統(tǒng)，如果PCR產(chǎn)物是平端的，是沒(méi)有辦法直接進(jìn)行TA克隆的！ PS，如果是這樣，你的T-vector倒是質(zhì)量不錯(cuò)啊，呵呵 |
4樓2011-08-26 23:17:13
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