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gloryping鐵桿木蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于RPMI1640培養(yǎng)基
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| 目前在培養(yǎng)正常的肝細胞和肝癌細胞，使用的培養(yǎng)基分別是用RPMI1640+20%FBS和RPMI1640+10%FBS。昨晚做正常細胞的傳代實驗，傳完后才發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基下面有一些白色碎片狀東西，然后將傳的三盤細胞丟了兩盤，留下一盤觀察是否污染。今早來看，培養(yǎng)基沒有渾濁，細胞貼壁效果很好，只是上面漂浮著一些死細胞，這可能是由于復蘇后沒傳幾代的緣故。自己不放心，又讓師兄來看，師兄說細胞沒有污染。但是放置冰箱中的培養(yǎng)基出現(xiàn)白色東西，卻不知道如何解釋。腫瘤細胞的培養(yǎng)基一直正常，而正常細胞的培養(yǎng)基已經(jīng)是第二次出現(xiàn)這種東西了，我操作過程是一樣的，為什么它老是出現(xiàn)白色東西？是污染嗎？還是由于正常細胞培養(yǎng)基血清濃度高而出現(xiàn)的蛋白質(zhì)結(jié)晶？希望有經(jīng)驗的人解答一下，萬分感謝！ |
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 細胞實驗 |
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【答案】應助回帖
gloryping(金幣+2): 2011-09-07 17:48:53
| 應該不是蛋白析出的問題，就算是純血清也沒有蛋白析出的，何況是稀釋了的。除非你用的血清質(zhì)量有問題。 細胞污染的話污染物也要同步生長且嚴重影響細胞生長，如果不是這種現(xiàn)象的話只能認為是雜質(zhì)或者代謝產(chǎn)物，不影響的，不用理會。另外不建議你自己去離心或者二次過濾血清，商品血清都是無菌處理過的，你這樣一折騰的話反而是畫蛇添足了。死細胞在任何培養(yǎng)體系里都是不能完全避免的，最初復蘇的時候是很嚴重的，后續(xù)培養(yǎng)時如果長時間不換液的話也會出現(xiàn)大量死亡，只要死亡量不是很大，活著的細胞狀態(tài)仍然很好就可以無視死細胞。 |
5樓2011-09-07 15:32:43
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9樓2011-09-07 17:53:13
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