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[交流]
northern雜交和southern雜交的區(qū)別
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| 請問northern雜交和southern雜交使用范圍上有事么區(qū)別,既然DNA更穩(wěn)定為什么不都用DNA來雜交呢? |
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木蟲 (正式寫手)
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Northern印跡雜交(Northern blot)。這是一種將RNA從瓊脂糖凝膠中轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上的方法。DNA印跡技術(shù)由Southern于1975年創(chuàng)建,稱為Southern印跡技術(shù),RNA印跡技術(shù)正好與DNA相對應(yīng),故被稱為Northern印跡雜交,與此原理相似的蛋白質(zhì)印跡技術(shù)則被稱為Western blot。 Southern印跡雜交是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上,經(jīng)干烤或者紫外線照射固定,再與相對應(yīng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交,用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色,從而檢測特定DNA分子的含量[1][2]。 簡言之,一個(gè)RNA;一個(gè)DNA |
木蟲 (職業(yè)作家)
木蟲 (職業(yè)作家)
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Northern blot 可用來檢測特定基因的表達(dá)豐度、樣式,還可用來檢測目的基因是否具有可變剪切產(chǎn)物或者重復(fù)序列等;Southern blot 較容易,一般用于基因拷貝數(shù)分析,指紋圖譜、早期分子標(biāo)記等 你的意思是將 RNA 反轉(zhuǎn)錄成cDNA后在轉(zhuǎn)到膜上。這個(gè)恐怕不行,因?yàn)樵谖已芯康倪@個(gè)物種中,有的RNA反轉(zhuǎn)錄得不到cDNA全長,這個(gè)自然不行。 |
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Northern印跡雜交(Northern blot)。這是一種將RNA從瓊脂糖凝膠中轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上的方法。DNA印跡技術(shù)由Southern于1975年創(chuàng)建,稱為Southern印跡技術(shù),RNA印跡技術(shù)正好與DNA相對應(yīng),故被稱為Northern印跡雜交,與此原理相似的蛋白質(zhì)印跡技術(shù)則被稱為Western blot。 Southern印跡雜交是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上,經(jīng)干烤或者紫外線照射固定,再與相對應(yīng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交,用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色,從而檢測特定DNA分子的含量[1][2]。 簡言之,一個(gè)RNA;一個(gè)DNA |
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Northern印跡雜交(Northern blot)。這是一種將RNA從瓊脂糖凝膠中轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上的方法。DNA印跡技術(shù)由Southern于1975年創(chuàng)建,稱為Southern印跡技術(shù),RNA印跡技術(shù)正好與DNA相對應(yīng),故被稱為Northern印跡雜交,與此原理相似的蛋白質(zhì)印跡技術(shù)則被稱為Western blot。 Southern印跡雜交是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上,經(jīng)干烤或者紫外線照射固定,再與相對應(yīng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交,用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色,從而檢測特定DNA分子的含量[1][2]。 簡言之,一個(gè)RNA;一個(gè)DNA |
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