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northern雜交和southern雜交的區(qū)別
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| 請(qǐng)問northern雜交和southern雜交使用范圍上有事么區(qū)別，既然DNA更穩(wěn)定為什么不都用DNA來雜交呢？ |
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yicao917(金幣+1): 謝謝參與
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Northern印跡雜交（Northern blot）。這是一種將RNA從瓊脂糖凝膠中轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上的方法。DNA印跡技術(shù)由Southern于1975年創(chuàng)建，稱為Southern印跡技術(shù)，RNA印跡技術(shù)正好與DNA相對(duì)應(yīng)，故被稱為Northern印跡雜交，與此原理相似的蛋白質(zhì)印跡技術(shù)則被稱為Western blot。 Southern印跡雜交是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段，將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上，經(jīng)干烤或者紫外線照射固定，再與相對(duì)應(yīng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交，用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色，從而檢測(cè)特定DNA分子的含量[1][2]。 簡(jiǎn)言之，一個(gè)ＲＮＡ；一個(gè)DNA |
9樓2012-04-17 08:46:55
wanhscn
木蟲 (職業(yè)作家)
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dhd997(金幣+3): good 2011-09-09 07:47:24
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dhd997(金幣+3): good 2011-09-09 07:47:24
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Northern blot 可用來檢測(cè)特定基因的表達(dá)豐度、樣式，還可用來檢測(cè)目的基因是否具有可變剪切產(chǎn)物或者重復(fù)序列等；Southern blot 較容易，一般用于基因拷貝數(shù)分析，指紋圖譜、早期分子標(biāo)記等 你的意思是將 RNA 反轉(zhuǎn)錄成cDNA后在轉(zhuǎn)到膜上。這個(gè)恐怕不行，因?yàn)樵谖已芯康倪@個(gè)物種中，有的RNA反轉(zhuǎn)錄得不到cDNA全長(zhǎng)，這個(gè)自然不行。 |
2樓2011-09-08 23:51:58
cdl007
木蟲 (正式寫手)
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dhd997(金幣+3): good 2011-09-09 07:47:33
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樓主的意思是為啥用northern，不用southern，不是轉(zhuǎn)成cDNA。。 northern是檢測(cè)的樣品中RNA的量，這些RNA是基因組DNA的一個(gè)子集，因?yàn)橛械幕蚰鉺outhern檢測(cè)到，但它不表達(dá)，沒有mRNA的條帶。你有的基因拷貝數(shù)多，但是mRNA表達(dá)量少。northern檢測(cè)你現(xiàn)在樣品里有什么基因在高表達(dá)，這是southern做不到的 |
3樓2011-09-09 06:17:14
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wanhscn(金幣+1): 鼓勵(lì)回帖交流！ 2011-09-09 16:04:23
yicao917(金幣+1):謝謝參與
wanhscn(金幣+1): 鼓勵(lì)回帖交流！ 2011-09-09 16:04:23
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Northern印跡雜交（Northern blot）。這是一種將RNA從瓊脂糖凝膠中轉(zhuǎn)印到硝酸纖維素膜上的方法。DNA印跡技術(shù)由Southern于1975年創(chuàng)建，稱為Southern印跡技術(shù)，RNA印跡技術(shù)正好與DNA相對(duì)應(yīng)，故被稱為Northern印跡雜交，與此原理相似的蛋白質(zhì)印跡技術(shù)則被稱為Western blot。 Southern印跡雜交是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNA片段，將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上，經(jīng)干烤或者紫外線照射固定，再與相對(duì)應(yīng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交，用放射自顯影或酶反應(yīng)顯色，從而檢測(cè)特定DNA分子的含量[1][2]。 簡(jiǎn)言之，一個(gè)ＲＮＡ；一個(gè)DNA |
5樓2011-09-09 14:50:09
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