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kjxyzxh001銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
攜帶轉(zhuǎn)座子的質(zhì)粒能做表達(dá)載體么？
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各位大蝦，我是做轉(zhuǎn)座子的，插入的宿主是支原體，所以轉(zhuǎn)座子比較小，最近看到一篇文章，其克隆方案如下： (figure 1、2) 小弟十分迷茫，這個(gè)pMT85質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到支原體基因組后，只能是兩個(gè)IR序列之間的片段插入了支原體基因組，而克隆方案中MCS1位點(diǎn)插入的要表達(dá)的四個(gè)片段都在轉(zhuǎn)座片段之外，是不能插入到支原體基因組的，應(yīng)該是不能轉(zhuǎn)錄并表達(dá)的吧，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果是檢測(cè)到了片段的表達(dá)，這應(yīng)該是pMT85自身的啟動(dòng)子造成片段的表達(dá)的吧？但這種攜帶轉(zhuǎn)座子的質(zhì)粒能作為表達(dá)載體嗎，還是兩個(gè)IR之外的片段（figure 3）也都插入了支原體基因組造成了表達(dá)， 請(qǐng)各位高手給予解答！小弟在此謝謝了！ |
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我也是做轉(zhuǎn)座子的、。只不過(guò)我是要轉(zhuǎn)植物，想問(wèn)問(wèn)前輩在克隆轉(zhuǎn)座子構(gòu)建過(guò)表達(dá)載體的過(guò)程中有沒(méi)有問(wèn)題？據(jù)說(shuō)它不表達(dá)？ 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
2樓2018-01-25 13:08:12
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