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lykyoung新蟲 (初入文壇)
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[求助]
請(qǐng)問能不能僅克隆單一基因的一小片段
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| 你好，我是做克隆的新手，我想克隆逆轉(zhuǎn)錄病毒MLV的pol 基因的一小片段，不知道分子克隆所說的目的基因是不是必須要是一整個(gè)基因，還是基因的一小部分也可以，但是如果僅克隆基因的一小片段的話，沒有啟動(dòng)密碼子和終止密碼子怎么辦，可以自己加入么，如果加入的話，是不是加在酶切位點(diǎn)的內(nèi)部，即pcr時(shí) 引物的設(shè)計(jì)包括：“保護(hù)堿基+酶切位點(diǎn)+起始密碼+互補(bǔ)堿基” |
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cdl007
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2樓2011-10-29 21:37:58
lykyoung
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3樓2011-10-30 20:06:17
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【答案】應(yīng)助回帖
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wanhscn(金幣+2): 鼓勵(lì)專家應(yīng)助回帖! 2011-10-31 12:32:42
wanhscn(金幣+2): 鼓勵(lì)專家應(yīng)助回帖! 2011-10-31 12:32:42
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質(zhì)粒設(shè)計(jì)時(shí)都需要加入啟動(dòng)子序列，以保證目的基因的表達(dá)。啟動(dòng)子可分為誘導(dǎo)型啟動(dòng)子和組成型啟動(dòng)子兩大類，后者包括CMV，SV40，T7, pMC1，PGK啟動(dòng)子等 pcDNA 3.1 采用的啟動(dòng)子是CMV CMV DNA只有一個(gè)單向性的IE啟動(dòng)子復(fù)合體，可指導(dǎo)多個(gè)基因的表達(dá) |
4樓2011-10-31 00:41:35
junxiao0320
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5樓2011-10-31 10:05:35
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