 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4906 | 回復(fù): 8 | ||
shenxing325銅蟲 (小有名氣)
|
[求助]
急！蛋白截短表達(dá)不成功~
|
情況是這樣的：我本來要表達(dá)一個蛋白，但是由于比較大，不容易表達(dá)（也是沒做出來 ），因此我就選N末端（疏水性）進(jìn)行表達(dá)。因?yàn)檫@一段前面還有信號肽，因此把這一段截出來的話我就人為在前面加上ATG以及在后面加上TGA�，F(xiàn)在經(jīng)過測序已經(jīng)正確的連接到表達(dá)載體上了，但是還是沒有表達(dá)（用SDS-PAGE作為檢測手段），各位有做過蛋白截短表達(dá)嘛？請幫忙找一下原因，謝謝！！也做了比較久了，各位幫幫忙~~ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有194人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 目的蛋白序列連接pet15b測序結(jié)果正確為何不表達(dá)
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 蛋白表達(dá)不明確，但是連菌體蛋白都不見
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 原核表達(dá)蛋白誘導(dǎo)不出來
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 原核表達(dá)系統(tǒng)不表達(dá)目的蛋白
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 蛋白表達(dá)量少 怎么辦
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá) 誘導(dǎo)時間的長短影不影響蛋白的活性�。�
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】急！急！急！ his標(biāo)簽表達(dá)的蛋白出問題了，求指導(dǎo)�。。�
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】我真暈~~~做培養(yǎng)基蛋白胨少加了一位小數(shù)點(diǎn)的~~大家說能長出菌嗎~~
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助/交流】蛋白誘導(dǎo)表達(dá)不出目標(biāo)條帶
已經(jīng)有41人回復(fù)
- 【求助/交流】血清中蛋白質(zhì)多少轉(zhuǎn)離心才能使其沉淀?
已經(jīng)有8人回復(fù)
sl35537417
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 36 (小學(xué)生)
- 金幣: 1204.7
- 散金: 148
- 紅花: 3
- 帖子: 396
- 在線: 225.1小時
- 蟲號: 381094
- 注冊: 2007-05-24
- 專業(yè): 神經(jīng)生物學(xué)
2樓2011-11-13 20:31:54
kokia
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 2054.2
- 散金: 1168
- 紅花: 5
- 帖子: 216
- 在線: 65.3小時
- 蟲號: 482988
- 注冊: 2007-12-26
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物學(xué)
3樓2011-11-13 22:09:13
shenxing325
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 102.5
- 紅花: 2
- 帖子: 73
- 在線: 26.8小時
- 蟲號: 1334715
- 注冊: 2011-06-30
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
4樓2011-11-14 09:00:47
shenxing325
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 102.5
- 紅花: 2
- 帖子: 73
- 在線: 26.8小時
- 蟲號: 1334715
- 注冊: 2011-06-30
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
5樓2011-11-14 09:01:13
shenxing325
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 102.5
- 紅花: 2
- 帖子: 73
- 在線: 26.8小時
- 蟲號: 1334715
- 注冊: 2011-06-30
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
6樓2011-11-15 08:50:30
shenxing325
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 102.5
- 紅花: 2
- 帖子: 73
- 在線: 26.8小時
- 蟲號: 1334715
- 注冊: 2011-06-30
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
7樓2011-11-18 10:23:30
brightfuture01
木蟲之王 (文壇精英)
我愛打老虎
- MolEPI: 14
- 應(yīng)助: 24 (小學(xué)生)
- 貴賓: 1.2
- 金幣: 113337
- 散金: 1526
- 紅花: 224
- 沙發(fā): 1
- 帖子: 28946
- 在線: 3690.6小時
- 蟲號: 464575
- 注冊: 2007-11-21
- 性別: GG
- 專業(yè): 神經(jīng)生物學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
wanhscn(金幣+2): Good！鼓勵應(yīng)助！ 2011-11-18 19:27:27
shenxing325(金幣+20): 因?yàn)槲覍?shí)驗(yàn)室里只有我一個人做這個方面更，其他人都不相關(guān)，所以自己摸索得還不夠，可以和你繼續(xù)交流嗎？你提供的信息對我很重要，謝謝！ 2011-11-19 10:38:05
wanhscn(金幣+2): Good！鼓勵應(yīng)助！ 2011-11-18 19:27:27
shenxing325(金幣+20): 因?yàn)槲覍?shí)驗(yàn)室里只有我一個人做這個方面更，其他人都不相關(guān)，所以自己摸索得還不夠，可以和你繼續(xù)交流嗎？你提供的信息對我很重要，謝謝！ 2011-11-19 10:38:05
|
我看樓主的專業(yè)像是做蛋白結(jié)構(gòu)的，我和你也算是同行。我們實(shí)驗(yàn)室做截短表達(dá)從來都不是像你這樣只做一個。 有些蛋白很難獲得可溶性表達(dá)，所以通常采用的就是truncation。對于一些我們真正感興趣的蛋白，為了篩到可溶性表達(dá)，我們都是幾個氨基酸殘基這樣一步一步截短，做不同的N,C端截短組合，幾百個克隆這樣做。我還沒聽說過樓主這樣的截短策略——盯住一個。 另外，在做截短之前需要對自己的蛋白二級結(jié)構(gòu)做很多判斷，比如存不存在disorder，哪些domain是真正重要的等等。 最后祝你試驗(yàn)順利。 |
8樓2011-11-18 12:49:13
AnkeyGO
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 99.6
- 帖子: 29
- 在線: 7.3小時
- 蟲號: 1441174
- 注冊: 2011-10-13
- 專業(yè): 生物化學(xué)
9樓2011-11-18 18:44:53
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 shenxing325 的主題更新
| 9 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿北京科技大學(xué)085601材料工程英一數(shù)二初試總分335求調(diào)劑 +7 | 雙馬尾痞老板2 2026-04-01 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085801 總分275 本科新能源 求調(diào)劑 +10 | bradoner 2026-04-01 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿南昌大學(xué)324求調(diào)劑 +12 | hanamiko 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +4 | 什么是胖頭魚 2026-03-30 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 食品學(xué)碩362求調(diào)劑 +3 | xuanxianxian 2026-04-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿西安交大材料學(xué)碩（英一數(shù)二）347，求調(diào)劑到高分子/材料相關(guān)專業(yè) +7 | zju51 2026-03-31 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大材料工程290求調(diào)劑 +18 | Youth_ 2026-03-30 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 0856初試324分求調(diào)劑 +5 | 想上學(xué)求調(diào) 2026-04-01 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿中國科學(xué)院大學(xué)265求調(diào)劑 +8 | 恬淡ye 2026-03-31 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程，267求調(diào)劑 +17 | minht 2026-03-26 | 17/850 |
|
|
|
[考研] 0856材料與化工調(diào)劑，339 +10 | 10213207 2026-03-31 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +7 | BrightLL 2026-03-29 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +8 | 11ggg 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 08工科求調(diào)劑286 +5 | tgs_001 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中師范化學(xué)332分求調(diào)劑 +3 | Lyy930824@ 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)321分求調(diào)劑 +10 | 三dd. 2026-03-30 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿北京工業(yè)大學(xué)，324分求調(diào)劑 +6 | 零八# 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 305求調(diào)劑 +8 | RuiFairyrui 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 藥學(xué)105500求調(diào)劑 +3 | Ssun。。 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑求收留 +7 | 果然有我 2026-03-26 | 7/350 |
|