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[求助]
關于Q-PCR的一些疑問
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最近在做Q-pcr，要擴增一個表達量很底的mRNA 設計了引物上機去做，溶解曲線不單一有兩個峰，一個大一點一個小一點，大一點的應該是產物，但兩峰高度差距不算太大，距離倒是蠻遠的 擴增曲線測定的Ct值在32左右，由于樣品的原因，提取的RNA可能不是很純，RNA濃度也不好提高了 改變過退火溫度，變化不大 換過很多引物，由于這個mRNA豐度太低，很多的引物都擴不出來 儀器自動分析的CT值在復孔之間差距0.5以內 想問一下，我這個數(shù)據(jù)可以用么，如果不行要怎樣提高擴增的特異性或者怎樣改變一下？ |
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terry130
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9樓2011-11-16 21:34:04
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4樓2011-11-15 18:47:58
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