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胡亂走走2011銀蟲 (著名寫手)
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[交流]
1500bp全長(zhǎng)的序列，設(shè)計(jì)引物時(shí)一般期望產(chǎn)物長(zhǎng)度為多長(zhǎng)呢？ 已有3人參與
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如題，我有一序列全長(zhǎng)1464bp，設(shè)計(jì)引物時(shí)pcr product size一般為多少最好呢？謝謝。 設(shè)計(jì)了很多對(duì)引物，做了pcr梯度擴(kuò)增，但都沒有條帶。 酶和模板都沒有問題，操作應(yīng)該不會(huì)有什么問題。 該從哪里改進(jìn)呢？謝謝高手指點(diǎn)。 |
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木蟲 (正式寫手)
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2樓2011-11-15 18:56:10
胡亂走走2011
銀蟲 (著名寫手)
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小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
wanhscn(金幣+2): 是的！很熱心！ 2011-11-16 16:20:06
小木蟲(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
wanhscn(金幣+2): 是的！很熱心！ 2011-11-16 16:20:06
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是啊，得看你自己的實(shí)驗(yàn)?zāi)康�。如果你需要全長(zhǎng)基因，那肯定是從起始密碼子到終止密碼子都要，要是你只要其中一段，只要不導(dǎo)致密碼子移位就行。怎么會(huì)提“設(shè)計(jì)引物時(shí)一般期望產(chǎn)物長(zhǎng)度為多長(zhǎng)呢”這樣的問題呢。 不過全長(zhǎng)可能還真不太好擴(kuò)，畢竟起始密碼子附近AT多，引物不太好設(shè)計(jì)，只能對(duì)著軟件不斷更改引物長(zhǎng)度，選一個(gè)最佳的引物長(zhǎng)度，我一般用primer premier 5看引物 |
5樓2011-11-16 10:48:07
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