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月之光羽

木蟲(chóng) (小有名氣)

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[交流] RT-PCR擴(kuò)增圖和溶解曲線跑成這樣

各位蟲(chóng)友，
最近做RT-PCR，擴(kuò)增圖和溶解曲線跑成這樣，我的退火溫度為57度，不知道怎么回事，同樣的條件，其它的做的挺好的，就是這幾個(gè)樣是這樣，求幫忙！

擴(kuò)增

溶解曲線

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1樓 2011-11-20 20:20:09

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wuyucool

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月之光羽(金幣+1):謝謝參與

看一下轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，這幾個(gè)基因表達(dá)的情況如何？引物做PCR結(jié)果如何？

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3樓2011-11-20 21:46:05

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blackrose8089

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如果模板都一樣的話，機(jī)子沒(méi)問(wèn)題，應(yīng)該是引物的事情。

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2樓2011-11-20 21:33:50

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月之光羽

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2樓: Originally posted by blackrose8089 at 2011-11-20 21:33:50:
如果模板都一樣的話，機(jī)子沒(méi)問(wèn)題，應(yīng)該是引物的事情。

我做了6個(gè)模板，同時(shí)做了6個(gè)基因，其中第2個(gè)模板的都是這種情況，并且都沒(méi)有給出CT值，還有兩個(gè)模板的3個(gè)基因也是這種情況，另外的都很好，剩下3個(gè)模板的6個(gè)基因都很好，所以引物估計(jì)沒(méi)問(wèn)題，是退火溫度還是其它？

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4樓2011-11-20 21:56:59

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3樓: Originally posted by wuyucool at 2011-11-20 21:46:05:
看一下轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，這幾個(gè)基因表達(dá)的情況如何？引物做PCR結(jié)果如何？

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5樓2011-11-20 22:35:28

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