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[求助]
關(guān)于蒽酮法測總糖
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用蒽酮法測果實(shí)中總糖，樣很多，麻煩蟲友們給點(diǎn)建議吧。還沒有開始做，有什么具體的方法或者注意事項(xiàng)，或者簡單有效的方法，謝謝大家啦 [ 來自科研家族 OMICS家族 ] |
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xujj.sofia
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2樓2011-12-14 10:56:33
dxxjhl
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
缺友情(金幣+5, 農(nóng)林EPI+1): 很專業(yè)，授予農(nóng)林EPI，歡迎常來農(nóng)林版！ 2011-12-14 11:55:33
xiaohaiyu(金幣+5): 謝謝啦 2011-12-19 11:06:17
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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xiaohaiyu(金幣+5): 謝謝啦 2011-12-19 11:06:17
 可溶性糖測定有個(gè)過濾過程很麻煩額��！下面是實(shí)驗(yàn)步驟（李玲，2009，植物生理學(xué)模塊實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)（很好的一本實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書）） （一）可溶性糖的提取 稱取新鮮果肉0.5-1.0g（或植物葉片或種子于105～110℃烘箱殺青15 min，然后將溫度調(diào)至70～80℃烘干至恒重，磨碎烘干的葉片或種子），剪碎研磨至勻漿，倒入三角瓶（50ml）中,加入10mL80％乙醇，置于80℃水浴中不斷攪拌40 min，冷卻后4000g離心10min，殘?jiān)?mL 80％乙醇重復(fù)提取2次，合并上清液。在收集液中加10 mg活性炭，80℃脫色30 min，過濾，80％乙醇定容至25mL，取濾液供測定。 （二）顯色及比色 吸取上述乙醇提取液0.2mL加入0.8ml蒸餾水混合，再加入5mL蒽酮試劑，沸水浴中顯色10 min，取出冷卻。在波長625 nm處測吸光值。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查取可溶性糖的含量。 （三）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 取標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液將其稀釋成0～100 μg•mL-1的不同濃度的溶液（0、10、20、40、60、80、100 μg•mL-1）。分別取1 mL，按上述方法進(jìn)行顯色、比色，測定625 nm處的吸光值， 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 可溶性糖含量（mg/g）=C*V*n/a*W*1000 式中：C為查到的待測果實(shí)中葡萄糖含量（ug/ml）;a為樣品提取液體積（ml）；V為提取液定容體積（ml）;n為稀釋倍數(shù)；W為果實(shí)重量（g）  注意事項(xiàng)：1.蒽酮試劑與糖反應(yīng)的呈色程度隨時(shí)間發(fā)生變化，故樣品要盡快比色； 2.顯色反應(yīng)非常靈敏，所用器皿需潔凈！  樓主說樣品多，實(shí)驗(yàn)量大，就預(yù)先找?guī)讉�(gè)趁手的幫手，祝樓主試驗(yàn)順利��！ |
3樓2011-12-14 11:16:19
4樓2011-12-14 11:45:45
fengyu4500
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5樓2011-12-14 17:01:01
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8樓2013-10-11 15:16:23
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