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小心點金蟲 (正式寫手)
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[求助]
HPLC兩種物質(zhì)區(qū)分不開的問題，拜托分析高手看下咧~
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我是做生物的，對于分析化學(xué)方面的問題不大明白。 最近要做個液相，分離對羥基苯氧乙酸（參看后面圖）和苯環(huán)上加了單羥基的對羥基苯氧丙酸。 我們這里有島津的液相，C18反向柱，我用了10%~90%的甲醇混水來分，怎么分都只是單峰啊。 請問按照化學(xué)方面來說，這兩個東西能區(qū)分開嗎？LC/MS檢測這個單峰有這兩種產(chǎn)物的分子量��？ 如果區(qū)分的話用哪種流動相呢？ 高手幫忙，謝謝~ 對羥基苯氧丙酸結(jié)構(gòu)式 [ Last edited by 小心點 on 2011-12-15 at 21:57 ] |
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小心點(金幣+3): 謝謝，這邊只有C18柱，你的意思是用0.05%甲酸加10%甲醇最好么？乙酸行么？我看乙酸也有人用的。 2011-12-16 19:04:10
408851978(金幣+1): 多多交流 2011-12-17 07:57:10
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408851978(金幣+1): 多多交流 2011-12-17 07:57:10
| 這兩個化合物都是酸性的，又是小分子，在C18上掛不住，很快就下來了，用0.05% 的甲酸，或者0.01% 的三氟乙酸做緩沖液，和高水相溶劑洗脫，比如前面建議的5-10%,或者看柱子要求，5%水相有點低了，直接用10%不變沖上20分鐘試試，或者10-30% 梯度洗脫先確定化合物大概什么濃度沖下里。最好用甲醇，乙腈洗脫力強，樣品會更掛不住�；蛘邠Q用C3柱，或者雙羥基柱（可用純水洗脫的） |
7樓2011-12-16 16:47:51
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