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zhang8826857鐵桿木蟲 (著名寫手)
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[求助]
藍(lán)白斑篩選時IPTG,Xgal,Amp的用量
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藍(lán)白斑篩選時IPTG,Xgal,Amp的用量具體是多少? 來個權(quán)威的。!看了網(wǎng)上好多說法,都不大相同。。。。。糾結(jié)的我啊! 要權(quán)威的啊。!咱不差錢。還有母液濃度,工作濃度等等 |
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鐵桿木蟲 (著名寫手)

木蟲 (正式寫手)
木蟲 (正式寫手)
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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首先把IPTG配制成24 mg/ml(100 mM)的水溶液,并進行過濾除菌后保存。然 后在100 ml的瓊脂培養(yǎng)基中,加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal(20 mg/ml 的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成IPTG、 X-Gal、Amp平板培養(yǎng)基。 當(dāng)DNA片段插入至pUC系列載體(或其他帶有l(wèi)acZ、Amp基因載體),然后轉(zhuǎn)化 至lacZ缺失細(xì)胞中后,涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培養(yǎng)基,可根據(jù)長出 菌體的藍(lán)白色,而方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組 體). 這是它們的原文,http://www.takara.com.cn/?action ... =445&subclass=1,這是鏈接,點擊一下說明書,下載就可以了。金幣就免了,哈哈。 |
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