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大腸桿菌轉(zhuǎn)化問題
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| 目的基因與載體雙酶切連接后，進(jìn)行大腸桿菌轉(zhuǎn)化時(shí)，除了重組DNA的連接轉(zhuǎn)化外，還必須要做的對(duì)照有哪兩個(gè)。為什么 |
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4樓2012-02-13 20:22:34
小丹木木
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【答案】應(yīng)助回帖
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西瓜(金幣+2): Good！ 2012-02-14 16:20:15
鉛釙鍶釔(金幣+2): 2012-02-18 10:51:09
西瓜(金幣+2): Good！ 2012-02-14 16:20:15
鉛釙鍶釔(金幣+2): 2012-02-18 10:51:09
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陰性對(duì)照：直接用感受態(tài)涂板，驗(yàn)證平板抗性是否有效（沒長(zhǎng)菌落，正 常； 長(zhǎng)了菌落，平板失效） 陽性對(duì)照：用感受態(tài)和一個(gè)抗性相同的已知的質(zhì)粒，驗(yàn)證感受態(tài)是否有效（長(zhǎng)了較多菌落，正常； 沒長(zhǎng)菌落，感受態(tài)有問題） 大概就這樣了 |
2樓2012-02-13 10:49:09
ixido
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【答案】應(yīng)助回帖
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小丹木木(金幣+2): 是可以加一個(gè)空載哦， 2012-02-14 10:30:54
鉛釙鍶釔(金幣+2): 2012-02-18 10:51:17
小丹木木(金幣+2): 是可以加一個(gè)空載哦， 2012-02-14 10:30:54
鉛釙鍶釔(金幣+2): 2012-02-18 10:51:17
| 我覺得，至少要做一個(gè)酶切載體不加目的基因進(jìn)行鏈接的轉(zhuǎn)化作為對(duì)照吧。如果這個(gè)不加目的基因的對(duì)照組不長(zhǎng)點(diǎn)或者長(zhǎng)的很少，證明你的載體酶切沒有問題，而且你加目的基因的連接產(chǎn)物應(yīng)該是含有你的目的基因而不是載體自連。這個(gè)對(duì)照組也能說明你的感受態(tài)和平板沒有問題。 |
3樓2012-02-13 12:52:26
5樓2012-02-14 14:21:03
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