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劉蓓蓓金蟲 (正式寫手)
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[求助]
MTT法求助--藥物溶解問題
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| 大家好，我現(xiàn)在在做藥物活性篩選，問題是我的單體化合物是皂苷四環(huán)三萜化合物，現(xiàn)在問題是，溶解不了，稀釋很多倍仍然可以看到小顆粒，我也嘗試先用DMSO溶解，但是一但用PBS稀釋就又析出，根本溶解不了，請問有什么好的方法可以溶解藥物，乙醇和DMSO最大濃度可以用到多少？ |
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4樓2012-02-20 08:32:16
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看標(biāo)題，您是想做MTT法檢測細(xì)胞水平的增殖抑制活性篩選么？ 你定的化合物篩選濃度是多少？通常來講，細(xì)胞水平的篩選，是以化合物篩選的最高濃度的至少100倍或更高倍數(shù)用100%的DMSO來配制母液的，比如你篩選的最高濃度是10uM，那配制的母液濃度至少也要在10mM以上，越高越好。因?yàn)檫@樣才能保證DMSO的終濃度均在1%以下。 你說的0.6mg的樣品，用4Ml 溶解都溶解不了，是指用100%的DMSO還是別的溶媒？ 如果你的化合物在PH7.4中的溶解度能達(dá)到100ug/ml的話，那已經(jīng)算是高溶解度的了。 只是在往后的PK，PD實(shí)驗(yàn)中如果要采用靜脈給藥的話，會(huì)碰到點(diǎn)問題。 |
7樓2012-07-24 11:49:16
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2樓2012-02-19 11:27:07
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
劉蓓蓓(金幣+2): ★★★很有幫助 2012-02-22 22:24:40
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劉蓓蓓(金幣+1): ★★★很有幫助 2012-02-22 22:25:08
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用DMSO溶解配成母液，直接稀釋到含血清的培養(yǎng)基中，現(xiàn)用現(xiàn)加會(huì)好些。注意DMSO終濃度一般低于五百分之一，最高也不能超過百分之一。對照組和空白組也得加同樣量的DMSO，否則DMSO對細(xì)胞膜的促透作用，會(huì)影響評價(jià)。 如果是單體或近似單體，盡量用摩爾濃度，有利于成果發(fā)表。 |
6樓2012-02-20 13:22:49
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10樓2013-08-30 14:05:52
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