劉蓓蓓

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[求助] MTT法求助--藥物溶解問(wèn)題

大家好，我現(xiàn)在在做藥物活性篩選，問(wèn)題是我的單體化合物是皂苷四環(huán)三萜化合物，現(xiàn)在問(wèn)題是，溶解不了，稀釋很多倍仍然可以看到小顆粒，我也嘗試先用DMSO溶解，但是一但用PBS稀釋就又析出，根本溶解不了，請(qǐng)問(wèn)有什么好的方法可以溶解藥物，乙醇和DMSO最大濃度可以用到多少？

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【討論】用DMSO溶解問(wèn)題已經(jīng)有12人回復(fù)

1樓 2012-02-19 10:37:54

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rosexie_2004

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leecius(金幣+1): 謝謝幫助。 2012-02-20 09:05:23
劉蓓蓓(金幣+1): ★有幫助 2012-02-20 11:20:47

DMSO的濃度一般在1%以下，不能太高。

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4樓2012-02-20 08:32:16

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zhongyun8668

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看標(biāo)題，您是想做MTT法檢測(cè)細(xì)胞水平的增殖抑制活性篩選么？
你定的化合物篩選濃度是多少？通常來(lái)講，細(xì)胞水平的篩選，是以化合物篩選的最高濃度的至少100倍或更高倍數(shù)用100%的DMSO來(lái)配制母液的，比如你篩選的最高濃度是10uM，那配制的母液濃度至少也要在10mM以上，越高越好。因?yàn)檫@樣才能保證DMSO的終濃度均在1%以下。
你說(shuō)的0.6mg的樣品，用4Ml 溶解都溶解不了，是指用100%的DMSO還是別的溶媒？
如果你的化合物在PH7.4中的溶解度能達(dá)到100ug/ml的話，那已經(jīng)算是高溶解度的了。
只是在往后的PK，PD實(shí)驗(yàn)中如果要采用靜脈給藥的話，會(huì)碰到點(diǎn)問(wèn)題。

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7樓2012-07-24 11:49:16

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
xiaoxiao270(金幣+1): 3Q 2012-02-19 18:03:47
劉蓓蓓(金幣+1): ★有幫助 2012-02-20 11:20:34

如果是一定，非要用PBS的話是有一點(diǎn)困難。我個(gè)人認(rèn)為有兩條路線，一是做結(jié)構(gòu)的修飾來(lái)提高你這個(gè)化合物的極性，或者想方設(shè)法來(lái)降低試劑的極性以適應(yīng)你這個(gè)化合物的極性。

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親愛(ài)的---我是正宗的90后哦

2樓2012-02-19 11:27:07

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cddryw

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leecius(金幣+1): 謝謝參與。 2012-02-20 09:05:16

你樣品的量多少？用多少DMSO溶解？

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劉蓓蓓

梅花精神

3樓2012-02-19 15:36:44

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引用回帖:

樓: Originally posted by cddryw at 2012-02-19 15:36:44:
你樣品的量多少？用多少DMSO溶解？

我都知用了0.6mg的樣品，用4Ml 溶解都溶解不了呀？

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5樓2012-02-20 11:20:01

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ylcui

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【答案】應(yīng)助回帖

感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
劉蓓蓓(金幣+2): ★★★很有幫助 2012-02-22 22:24:40
劉蓓蓓(金幣+1): ★★★很有幫助 2012-02-22 22:25:08

用DMSO溶解配成母液，直接稀釋到含血清的培養(yǎng)基中，現(xiàn)用現(xiàn)加會(huì)好些。注意DMSO終濃度一般低于五百分之一，最高也不能超過(guò)百分之一。對(duì)照組和空白組也得加同樣量的DMSO，否則DMSO對(duì)細(xì)胞膜的促透作用，會(huì)影響評(píng)價(jià)。
如果是單體或近似單體，盡量用摩爾濃度，有利于成果發(fā)表。

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6樓2012-02-20 13:22:49

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食品科學(xué)2012

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用DMSO不能溶解，不妨用甲醇或者氯仿等有機(jī)溶劑進(jìn)行溶解，但是要記錄好所用溶劑的比例，為了加藥時(shí)做空白對(duì)照用！我們實(shí)驗(yàn)室一直在用！

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8樓2012-11-26 13:11:27

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倪言

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引用回帖:

4樓: Originally posted by rosexie_2004 at 2012-02-20 08:32:16
DMSO的濃度一般在1%以下，不能太高。

我想知道，1%的濃度是怎么配的，一般我是直接用的分析純，我也不知道分析純的濃度是多少啊？

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9樓2013-08-30 13:55:50

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我之前也遇到DMSO的問(wèn)題，查了很多文獻(xiàn)資料，比較權(quán)威的說(shuō)法是0.1% DMSO是不影響的，先用DMSO溶，然后直接用培養(yǎng)基稀釋到你需要的測(cè)試濃度后加入96孔板，如果用pbs的話，pbs加入的兩也不能太多啊，這樣也不是很好

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10樓2013-08-30 14:05:52

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