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沁雪飄逸新蟲 (小有名氣)
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[求助]
怎么測定氨基氮的轉(zhuǎn)化率?
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怎么測定氨基氮的轉(zhuǎn)化率?求方法? 月桂酰氯與多肽聚合物反應后怎么測定其轉(zhuǎn)化率?我想測定氨基氮的轉(zhuǎn)化率,可是暫時沒想到方法,求解? |
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arokas
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2樓2012-02-19 20:12:13
arokas
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【答案】應助回帖
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氨氮測定 （發(fā)酵液中氨氮含量通過酚-次氯酸法） （1）容器的清洗：所有配制試劑的容器都用重鉻酸鉀洗液浸洗后清水沖洗干凈，并用去離子水潤洗三次烘干。 （2）試劑的配制：所有試劑都用超純水配制。 試劑A：苯酚10 g/L，亞硝基鐵氰化鈉•2H2O 100 mg/L，37℃時實測pH為7.5-7.8。4℃避光可存30天以上。 試劑B-Ⅰ：緩沖溶液體系分別含有0.4 M Na2HPO4和0.2 M NaOH，37℃時實測pH為11.5-11.6。室溫存放不超過60天。 試劑B-Ⅱ：以NaClO成品溶液（標示活性氯≥5.2%）配制NaOH溶液。NaOH含量為 2 mol/L。 試劑B：試劑B-Ⅱ：試劑B-Ⅰ=1:100 (v/v), 37℃時實測pH約為11.50-11.70，混合搖勻備用，配置后于4℃可保存14天。 銨標準液貯存液：稱取3.819 g經(jīng)100oC干燥過的優(yōu)級純氯化銨溶解于水中，移入1000 mL容量瓶中，稀釋至標線（溶液濃度為 1.00 mg氨基氮/mL)。 （3）繪制標準曲線 將銨標準貯存液進行一系列稀釋，分別為100倍、50倍、40倍、20倍、10倍。依次加入20 μL標準溶液（系列濃度梯度稀釋后），2.5 mL的試劑A和2.5 mL的試劑B，10s內(nèi)立即搖勻，于37oC水浴中保溫30 min，取出于630nm處比色測定，蒸餾水調(diào)零（20 min內(nèi)完成全部測定）。繪制標準曲線。如圖2.1，在氨氮檢測劑量0-2 μg內(nèi)，氨氮含量和A630nm間有很好的線性相關(guān)性。 標樣濃度（N mg/mL） 0 0.01 0.02 0.025 0.05 0.1 1 取液量（定容10mL） 0 0.1 0.2 0.25 0.5 1 10 標品測定量（µg） 0 1 4 6.25 25 100 10000 A630nm 以標品測定量（µg）為橫坐標，對應的吸光值A(chǔ)630nm為縱坐標，繪制標準曲線，并回歸如下方程式： Y=AX+B，其中R2應大于0.99。 （4）樣品測定 將待測樣品于10,000×g 4°C離心5 min，取無油脂上清液進行測定。 根據(jù)待測樣品中大概氨氮含量，對樣品系列稀釋（稀釋倍數(shù)n為1,10,100,1000）。于試管中依次加入20 μL樣品稀釋液，2.5 mL的試劑A和2.5 mL的試劑B，10s內(nèi)立即搖勻，于37oC水浴中保溫30-50 min，取出于630 nm處比色測定，蒸餾水調(diào)零�？瞻讟悠坊旌弦何庵祽獮�0.010-0.040（這決定于所用試劑的質(zhì)量以及蒸餾水的純度）。計算公式如下所示： 其中，AN為樣品中的氨氮濃度(g/L)；n為樣品稀釋倍數(shù)，A630 nm為樣品在630 nm下的吸光值，A和 B為標準曲線回歸公式中的系數(shù)。當A630 nm測定數(shù)值在0.08-0.8范圍所對應的稀釋倍數(shù)為有效稀釋倍數(shù)，如不在此范圍內(nèi)可調(diào)節(jié)樣品的稀釋倍數(shù)，使測量值在此范圍內(nèi)）。 |
3樓2012-02-19 20:12:54
沁雪飄逸
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4樓2012-02-22 11:18:31
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5樓2012-02-22 11:19:45
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