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反轉(zhuǎn)錄引物問題
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在反轉(zhuǎn)錄時(shí),由于用oligo dt做引物時(shí),可能由于模板太長(3000的樣子),5‘端出不來。我用了oligo dt 與隨機(jī)引物聯(lián)用,好像5’端還是出不來(mRNA應(yīng)該沒有降解)。我準(zhǔn)備用特異性引物與oligo dt聯(lián)用或者兩條以上基因下游特異性引物聯(lián)用,不知道能不能擴(kuò)出比較長的片段。有一個(gè)問題是,對于同一條mRNA,mlv是否有連接不同段的cDNA連接酶的活性? [ Last edited by 一葦渡江.hr on 2012-2-25 at 03:06 ] |
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