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閨閨love銅蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
小鼠胚胎培養(yǎng)液KSOM的問(wèn)題
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| KSOM好像只有Millipore有是嗎？不知道Millipore怎么回事，現(xiàn)在訂藥品總是很不給力的老是訂不上。我想自己配KSOM呢，但是照著《小鼠胚胎操作》那本書(shū)上的配方配出來(lái)的液體效果不理想。不知各位有KSOM的比較成熟的配方嗎？謝謝！ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
閨閨love: 金幣+2, ★有幫助 2012-03-19 19:01:31
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
閨閨love: 金幣+2, ★有幫助 2012-03-19 19:01:31
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書(shū)上的配方?jīng)]問(wèn)題，我們培養(yǎng)受精卵囊胚率可以達(dá)到100%。 如果要優(yōu)化，BSA可以加到6或8，效果非常好。 不知道你用的是什么試劑，必須用Sigma和Gibco。水質(zhì)也非常重要。胚胎對(duì)這個(gè)還是很敏感的。 小鼠本身飼養(yǎng)條件也是必須控制的。 不知道你說(shuō)的效果不理想是指什么。阻滯、發(fā)育不好、胚胎質(zhì)量差？ |
2樓2012-03-18 23:16:25
閨閨love
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3樓2012-03-19 19:08:25
★ ★ ★
telomerase: 金幣+3, 謝謝你的熱心應(yīng)助，分享經(jīng)驗(yàn)�。�！ 2012-03-20 09:27:33
telomerase: 金幣+3, 謝謝你的熱心應(yīng)助，分享經(jīng)驗(yàn)�。�！ 2012-03-20 09:27:33
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如果有阻滯肯定是某個(gè)成分有問(wèn)題。 我們也不測(cè)滲透壓，沒(méi)必要。 PH第一次調(diào)完后，要放到培養(yǎng)箱2-4h，拿出來(lái)再調(diào)到7.5。 這樣找原因太困難了。其實(shí)最好的辦法是你找一個(gè)實(shí)驗(yàn)室，去跟著做一次，養(yǎng)到囊胚。以后就能做好了。 我們實(shí)驗(yàn)室的師弟師妹開(kāi)始也會(huì)遇到這種問(wèn)題，跟著做一兩次就好了，也說(shuō)不上到底錯(cuò)誤出在哪里。不過(guò)倒是有人配的液體一加酚紅就是紫的，那肯定是某個(gè)成分加錯(cuò)了，應(yīng)該是黃色。 要是特別有錢(qián)買(mǎi)也無(wú)所謂啦  。除了KSOM，G1/G2更好用。有錢(qián)就買(mǎi)這個(gè)吧。 |
4樓2012-03-20 00:04:38
timmychina
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5樓2012-04-20 11:37:04
6樓2012-04-23 17:00:33
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7樓2012-05-05 15:43:10
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10樓2012-05-09 16:59:30
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