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閨閨love銅蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
小鼠胚胎培養(yǎng)液KSOM的問(wèn)題
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| KSOM好像只有Millipore有是嗎?不知道Millipore怎么回事,現(xiàn)在訂藥品總是很不給力的老是訂不上。我想自己配KSOM呢,但是照著《小鼠胚胎操作》那本書(shū)上的配方配出來(lái)的液體效果不理想。不知各位有KSOM的比較成熟的配方嗎?謝謝! |
銅蟲(chóng) (初入文壇)
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書(shū)上的配方?jīng)]問(wèn)題,我們培養(yǎng)受精卵囊胚率可以達(dá)到100%。 如果要優(yōu)化,BSA可以加到6或8,效果非常好。 不知道你用的是什么試劑,必須用Sigma和Gibco。水質(zhì)也非常重要。胚胎對(duì)這個(gè)還是很敏感的。 小鼠本身飼養(yǎng)條件也是必須控制的。 不知道你說(shuō)的效果不理想是指什么。阻滯、發(fā)育不好、胚胎質(zhì)量差? |

銅蟲(chóng) (初入文壇)
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如果有阻滯肯定是某個(gè)成分有問(wèn)題。 我們也不測(cè)滲透壓,沒(méi)必要。 PH第一次調(diào)完后,要放到培養(yǎng)箱2-4h,拿出來(lái)再調(diào)到7.5。 這樣找原因太困難了。其實(shí)最好的辦法是你找一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,去跟著做一次,養(yǎng)到囊胚。以后就能做好了。 我們實(shí)驗(yàn)室的師弟師妹開(kāi)始也會(huì)遇到這種問(wèn)題,跟著做一兩次就好了,也說(shuō)不上到底錯(cuò)誤出在哪里。不過(guò)倒是有人配的液體一加酚紅就是紫的,那肯定是某個(gè)成分加錯(cuò)了,應(yīng)該是黃色。 要是特別有錢買也無(wú)所謂啦 。除了KSOM,G1/G2更好用。有錢就買這個(gè)吧。 |

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