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[求助]
關(guān)于以基因組為模板的PCR,求教條件的優(yōu)化
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最近以基因組為模板做PCR 設(shè)計了各種引物 從250bp - 1KB產(chǎn)物的都有 但是總是出現(xiàn)以下幾種情況: 1、不是所有的樣本都可以P出目的條帶(我確定樣本中肯定是有目的片段的) 2、P出的條帶特異性不強(qiáng),總是有雜帶 用的酶有一般的Taq 、 Takara Taq HS 、KOD、KOD PLUS== 體系是按照每個酶的說明配制的 特異性不強(qiáng)的話 我就升高溫度P 可是還是有類似Smear的東西 一般大家怎么優(yōu)化條件呢 求教 |
銀蟲 (小有名氣)
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