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wenzi9888木蟲 (正式寫手)
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[求助]
[求助]明膠的純化方法及過程
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蟲子我學(xué)材料的，買了瓶化學(xué)純的明膠，實驗時發(fā)現(xiàn)純度不夠，好像又沒有分析純的試劑購買，因此在這求助怎么把化學(xué)純的明膠進(jìn)一步提純以及要注意些什么問題，請給出詳細(xì)點(diǎn)的步驟，謝謝！ 方法最好簡單可行！  [ Last edited by wenzi9888 on 2012-3-9 at 10:19 ] |
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lixiangde(金幣+1): 感謝回帖交流 2012-03-10 11:58:55
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明膠的性質(zhì)穩(wěn)定與否也是與你的應(yīng)用方式和目的相關(guān)聯(lián)的，在一定范圍內(nèi)，質(zhì)量等級較高的明膠還是具有穩(wěn)定性的。某些市售的國產(chǎn)明膠可能本身就不是為了科研而生產(chǎn)的，所以純度不是很高，且批次之間的差異會比較明顯。如果你的實驗要求比較高，還是買好點(diǎn)的吧，比如sigma的。 簡單的純化方法樓上都說了，樓主根據(jù)自己的需要進(jìn)行選擇。 |
9樓2012-03-09 17:17:18
iceinwater
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【答案】應(yīng)助回帖
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wenzi9888(金幣+10): ★有幫助 2012-03-09 16:21:02
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明膠本來就是一種混合物，就像合成高分子一樣，它的分子量是呈一定范圍內(nèi)的分布狀態(tài)的，所以基本上很難做到真正的純化。 如果樓主的意思是明膠中含有非明膠成分的其他雜質(zhì)的話，那可能還可以根據(jù)需要進(jìn)行一些純化操作。但是想徹底做到分析純的級別，估計很有難度。而且在純化過程中會伴隨明膠性質(zhì)的變化。 |
2樓2012-03-09 10:51:18
wenzi9888
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3樓2012-03-09 11:36:37
4樓2012-03-09 13:15:42
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5樓2012-03-09 13:34:47
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6樓2012-03-09 13:41:00
【答案】應(yīng)助回帖
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lixiangde(金幣+1): 感謝回帖交流 2012-03-09 16:52:17
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除掉低分子量的蛋白直接透析， 根據(jù)你要確定蛋白的分子量，選擇合適透析帶就好了。。。2k，3.5k，8k，10k，12k。。。100-100000分子量的透析袋均有。 透析就好了，不斷換水，透掉低分子量的。 最后凍干就好了。 若是有高分子量的雜質(zhì)，鹽析就比較重要 鹽析要查文獻(xiàn)， 看看要到添加到多少濃度的才能使的蛋白沉淀下來。（可以使雜質(zhì)沉淀，也可以是目標(biāo)蛋白） 離心取沉淀，或者清夜。 再透析。 凍干。。。 鹽析在除掉雜蛋白中效果比較明顯，嚴(yán)重推薦。。。 |
7樓2012-03-09 16:50:32
【答案】應(yīng)助回帖
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lixiangde(金幣+1): 感謝回帖交流 2012-03-10 11:58:48
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http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=1310018 想系統(tǒng)學(xué)習(xí)可以看看這個帖子。。 若是急欲得到實驗方案，看看別人的文章蛋白是怎么得到的。。。 若有詳細(xì)的鹽析數(shù)據(jù)就可以參考啦。。。 真沒有直接過透析效果有點(diǎn)差，可以考慮超濾。。主要是分子量啊。。。沒分子量我也不好給你建議啊。。。 |
8樓2012-03-09 17:07:43
10樓2012-03-12 08:42:31
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