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lx19880717金蟲 (初入文壇)
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[求助]
pET-28a原核不能表達目的蛋白 已有2人參與
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我在做原核表達的過程中，使用了pET-28a載體，Rosetta（DE3）表達菌株，但是37℃誘導表達后，連包涵體都沒有看到，基本沒有任何的蛋白表達，所以想請問一下大家，能不能幫我分析一下是什么原因？謝謝。 PS：我的目的蛋白大量重復(fù)序列，是否是由于重復(fù)序列導致蛋白在表達過程中無法折疊，如果是這個原因有什么辦法可以解決，謝謝。 |
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哈哈，這個我做多了，首先要確定你的克隆是沒問題的。關(guān)于表達，每個蛋白的表達環(huán)境還是有一定差距的，誘導條件有一定的差距，主要是誘導前的細菌OD,一般在細菌的對數(shù)生長期，有的蛋白在OD 600為0.6時誘導效果最好，有的在1.0時誘導最好，看你是什么條件， 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
14樓2016-04-03 16:08:28
2樓2012-03-12 16:58:46
lx19880717
金蟲 (初入文壇)
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- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
3樓2012-03-12 20:33:16
zhiqiang5070
木蟲 (正式寫手)
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- 專業(yè): 抗腫瘤藥物藥理
4樓2012-03-14 17:49:04
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