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huahua806341新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
培養(yǎng)細(xì)胞中乳酸和氨
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在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中 乳酸和氨的含量是判斷細(xì)胞生長(zhǎng)情況的標(biāo)志之二，但是通過(guò)它們的積累量究竟可以看出什么 可以判斷出什么 怎么判斷？ 另外，我還發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)完細(xì)胞的培養(yǎng)基放置幾天后，乳酸值會(huì)增高，這是怎么回事？ |
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你可以先看看文獻(xiàn)，了解你所培養(yǎng)的細(xì)胞的代謝途徑，根據(jù)乳酸所處的代謝地位來(lái)判定該細(xì)胞的狀態(tài)。如果是正常代謝下就是產(chǎn)生乳酸或者乳酸是正常代謝的中間產(chǎn)物，那應(yīng)該是表明細(xì)胞比較活躍，代謝正常，而要是其正常條件下不會(huì)產(chǎn)生乳酸，只有在特殊條件下才產(chǎn)生乳酸的話，那應(yīng)該就是說(shuō)細(xì)胞處于被脅迫的狀態(tài)了~ 具體還是要根據(jù)你的培養(yǎng)條件和細(xì)胞特性來(lái)定的吧 |
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6樓2012-03-27 18:22:51
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 乳酸和氨主要是代謝產(chǎn)物。通過(guò)測(cè)定代謝產(chǎn)物可以了解細(xì)胞的生長(zhǎng)情況的 |
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4樓2012-03-27 14:54:22
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
我做的是CHO細(xì)胞，一般在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期乳酸和氨都快速累積，進(jìn)入穩(wěn)定期后其濃度基本不再增加。有些細(xì)胞系可能在培養(yǎng)后期把乳酸吃掉（將乳酸作為碳源利用），這是比較理想的狀態(tài)。 |
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8樓2012-03-28 17:22:05
肖穎2009
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhaohq1209: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖鼓勵(lì)交流哈 2012-03-26 23:11:41
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhaohq1209: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖鼓勵(lì)交流哈 2012-03-26 23:11:41
| 你確定一定是乳酸嗎？我覺(jué)得是酸性物質(zhì)更準(zhǔn)確吧，這是細(xì)胞代謝時(shí)產(chǎn)生的一些物質(zhì)呈酸性的結(jié)果，一般培養(yǎng)基的顏色會(huì)發(fā)生變化就是這個(gè)造成的。 |
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2樓2012-03-26 19:07:49
huahua806341
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3樓2012-03-26 20:35:51
huahua806341
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5樓2012-03-27 18:14:55
huahua806341
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7樓2012-03-27 18:29:56
huahua806341
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送鮮花一朵 |
sengyuhu，您好，我做的也是CHO細(xì)胞，最近檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞很多，但乳酸值很低，這種情況說(shuō)明細(xì)胞代謝狀況不好嗎？還有，CHO細(xì)胞目前不再全是規(guī)則的梭形，不論細(xì)胞長(zhǎng)的滿不滿都會(huì)有圓形未伸展開(kāi)的細(xì)胞。這是怎么導(dǎo)致的，有改善的方法嗎？您可以看看這個(gè)圖，http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=4269842，謝謝！ |
9樓2012-03-28 18:37:06
【答案】應(yīng)助回帖
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對(duì)我們來(lái)說(shuō)，乳酸越低說(shuō)明細(xì)胞的代謝狀態(tài)良好，在穩(wěn)定期以后能夠維持更長(zhǎng)時(shí)間。（但也不能只是憑這一個(gè)參數(shù)來(lái)判斷，是不是可以跟你以前的數(shù)據(jù)比較下，看看乳酸濃度跟細(xì)胞狀態(tài)有沒(méi)有關(guān)聯(lián)） 我養(yǎng)的都是馴化到懸浮培養(yǎng)的CHO細(xì)胞，所以對(duì)你的貼壁CHO細(xì)胞梭形與圓形的問(wèn)題不太了解，但我養(yǎng)過(guò)的懸浮細(xì)胞在有時(shí)會(huì)發(fā)生一定的貼壁現(xiàn)象。 我不是很了解細(xì)胞貼壁的過(guò)程，個(gè)人感覺(jué)出現(xiàn)圓形細(xì)胞可能跟你的細(xì)胞生長(zhǎng)變快有點(diǎn)關(guān)系，細(xì)胞生長(zhǎng)可能隨著代次的增加越來(lái)越快。 |
10樓2012-03-30 09:30:14
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