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[求助]
培養(yǎng)細胞中乳酸和氨
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在細胞培養(yǎng)過程中 乳酸和氨的含量是判斷細胞生長情況的標志之二,但是通過它們的積累量究竟可以看出什么 可以判斷出什么 怎么判斷? 另外,我還發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)完細胞的培養(yǎng)基放置幾天后,乳酸值會增高,這是怎么回事? |
榮譽版主 (文學泰斗)
此漂已死,有事燒紙 4-8
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你可以先看看文獻,了解你所培養(yǎng)的細胞的代謝途徑,根據(jù)乳酸所處的代謝地位來判定該細胞的狀態(tài)。如果是正常代謝下就是產(chǎn)生乳酸或者乳酸是正常代謝的中間產(chǎn)物,那應該是表明細胞比較活躍,代謝正常,而要是其正常條件下不會產(chǎn)生乳酸,只有在特殊條件下才產(chǎn)生乳酸的話,那應該就是說細胞處于被脅迫的狀態(tài)了~ 具體還是要根據(jù)你的培養(yǎng)條件和細胞特性來定的吧 |

榮譽版主 (文學泰斗)
此漂已死,有事燒紙 4-8
| 乳酸和氨主要是代謝產(chǎn)物。通過測定代謝產(chǎn)物可以了解細胞的生長情況的 |

我做的是CHO細胞,一般在對數(shù)生長期乳酸和氨都快速累積,進入穩(wěn)定期后其濃度基本不再增加。有些細胞系可能在培養(yǎng)后期把乳酸吃掉(將乳酸作為碳源利用),這是比較理想的狀態(tài)。 |

鐵蟲 (正式寫手)
| 你確定一定是乳酸嗎?我覺得是酸性物質(zhì)更準確吧,這是細胞代謝時產(chǎn)生的一些物質(zhì)呈酸性的結(jié)果,一般培養(yǎng)基的顏色會發(fā)生變化就是這個造成的。 |
送鮮花一朵 |
sengyuhu,您好,我做的也是CHO細胞,最近檢測發(fā)現(xiàn)細胞很多,但乳酸值很低,這種情況說明細胞代謝狀況不好嗎?還有,CHO細胞目前不再全是規(guī)則的梭形,不論細胞長的滿不滿都會有圓形未伸展開的細胞。這是怎么導致的,有改善的方法嗎?您可以看看這個圖,http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=4269842,謝謝! |
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對我們來說,乳酸越低說明細胞的代謝狀態(tài)良好,在穩(wěn)定期以后能夠維持更長時間。(但也不能只是憑這一個參數(shù)來判斷,是不是可以跟你以前的數(shù)據(jù)比較下,看看乳酸濃度跟細胞狀態(tài)有沒有關(guān)聯(lián)) 我養(yǎng)的都是馴化到懸浮培養(yǎng)的CHO細胞,所以對你的貼壁CHO細胞梭形與圓形的問題不太了解,但我養(yǎng)過的懸浮細胞在有時會發(fā)生一定的貼壁現(xiàn)象。 我不是很了解細胞貼壁的過程,個人感覺出現(xiàn)圓形細胞可能跟你的細胞生長變快有點關(guān)系,細胞生長可能隨著代次的增加越來越快。 |

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