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dd812007135木蟲 (正式寫手)
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[求助]
細胞培養(yǎng)后形態(tài)變得不太規(guī)則的因素
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HEla細胞經(jīng)傳代后，經(jīng)12小時的培養(yǎng)后，觀察有大量的圓亮點，以及細胞形態(tài)也變得不太規(guī)則，又不是污染的癥狀，高手們，請問是不是我操作上有什么問題？ 1.吸除舊培養(yǎng)液，加入5MLPBS洗滌，重復(fù)一次。 2。加入1.5ML胰酶消化1分鐘。 3。吸掉胰酶，加入5ML新鮮培養(yǎng)液，吹打（吹打時不知老是會有氣泡） 4.移入離心管離心5分鐘，倒掉上清液，加入1ML培養(yǎng)液，吹打。 5.在新培養(yǎng)瓶中加入5ml培養(yǎng)液，接入300ul細胞液。 6.放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 |
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肖穎2009
鐵蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhaohq1209: 金幣+2, 鼓勵交流~經(jīng)驗交流哈 2012-03-29 20:35:52
silicare: 金幣+3, BioEPI+1, 歡迎常來生物科學(xué)版交流 2012-03-30 19:07:58
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhaohq1209: 金幣+2, 鼓勵交流~經(jīng)驗交流哈 2012-03-29 20:35:52
silicare: 金幣+3, BioEPI+1, 歡迎常來生物科學(xué)版交流 2012-03-30 19:07:58
細胞變圓應(yīng)該是老化的原因，傳代次數(shù)多了有變圓的細胞出現(xiàn)屬正�，F(xiàn)象。細胞形態(tài)不規(guī)則的問題，我培養(yǎng)的細胞也出現(xiàn)過，你往培養(yǎng)液里加點谷氨酰胺看看，谷氨酰胺在培養(yǎng)液中很不穩(wěn)定，容易降解，需要一段時間后補加，具體配方你可以查一下，如有需要我也可以告訴你~ 我在往培養(yǎng)液中加了谷氨酰胺后細胞的狀態(tài)明顯有好轉(zhuǎn)，現(xiàn)在長得很好。祝實驗順利！ |
3樓2012-03-29 20:18:36
wtyyyyy1988
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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2樓2012-03-29 14:27:58
dd812007135
木蟲 (正式寫手)
送鮮花一朵
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4樓2012-04-04 00:52:26
dd812007135
木蟲 (正式寫手)
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5樓2012-04-04 00:53:16
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